肾衰营养胶囊对CRF营养不良Wnt7a信号通路的影响

The incidence of malnutrition with CRF is higher,and closely related to the prognosis of CRF,and the pathogenesis has not been elucidated. Study finds that Wnt7a pathway regulates the function of MSC, and promotes the growth and restoration of skeletal muscle,but the mechanism on skeletal muscle atrophy in CRF with malnutrition is unclear. We found that the expression of Wnt7a in skeletal muscle tissue of animal models of CRF with malnutrition was downregulated,and associated with skeletal muscle atrophy. To profoundly study the effect of Wnt7a pathway on the pathogenesis of malnutrition in CRF, we intend to establish animal model of CRF with malnutrition and siRNA knocking-down of wnt7a gene, to study the role of Wnt7a-PCP（Fzd7 、Vangl2、Rac、ROCK-2、Rho、JNK）pathways and Wnt7a-AKT/mTOR（Fzd7、PI3K、Akt、mTOR）on the function and activity of MSC ,and the effect of MSC in the mechanism of skeletal muscle atrophy, and application of Shenshuai Yingyang capsules, to explore the role of Wnt7a in the pathogenesis of in CRF with malnutrition and the molecular mechanism of Shenshuai Yingyang capsules for treatment of CRF with malnutrition.

CRF营养不良发生率高，与CRF预后密切相关，发生机制尚未阐明。研究发现Wnt7a信号通路有调控MSC的功能，促进骨骼肌组织生长和修复，但在CRF营养不良所致骨骼肌萎缩发生中的作用机制尚不清楚。我们通过预实验发现，CRF营养不良动物模型骨骼肌组织Wnt7a表达下调，与骨骼肌萎缩相关。为了深入研究Wnt7a信号通路在CRF营养不良发生中的作用，我们拟通过建立CRF营养不良动物模型和siRNA沉默Wnt7a基因细胞模型，研究Wnt7a-PCP（Fzd7 、Vangl2、Rac、ROCK-2、Rho、JNK）信号通路和Wnt7a-AKT/mTOR（Fzd7、PI3K、Akt、mTOR）信号通路对肌卫星细胞（MSC）功能和活性的调节作用及MSC对骨骼肌萎缩的作用，通过应用肾衰营养胶囊进行干预，探讨Wnt7a调控信号通路在CRF营养不良发生中的作用及肾衰营养胶囊改善CRF营养不良的分子机制。

CRF营养不良发生率高，与CRF预后密切相关，发生机制尚未阐明。研究发现Wnt7a信号通路有调控MSC的功能，促进骨骼肌组织生长和修复，但在CRF营养不良所致骨骼肌萎缩发生中的作用机制尚不清楚。本项目通过建立CRF营养不良动物模型，研究肾衰营养胶囊对CRF营养不良的治疗作用，体外建立C2C12骨骼肌营养不良模型，通过Wnt7a-PCP（Fzd7 、Vangl2、Rac、ROCK-2、Rho、JNK）和Wnt7a-AKT/mTOR（Fzd7、PI3K、Akt、mTOR）两条信号通路证明其对肌卫星细胞（MSC）功能和活性的调节作用及MSC对骨骼肌萎缩的作用，通过应用肾衰营养胶囊及其有效中药单体藁本内酯、黄芪多糖、大黄素进行干预，探讨Wnt7a调控信号通路在CRF营养不良发生中的作用及肾衰营养胶囊改善CRF营养不良的分子机制。结果显示：肾衰营养胶囊可降低CRF营养不良大鼠血尿素氮、血肌酐水平，提高血白蛋白水平,改善骨骼肌萎缩萎缩状态，。肾衰营养胶囊抑制促凋亡基因Bax的表达和增加抑凋亡基因Bcl-2的表达抑制CRF骨骼肌细胞凋亡，以及上调CRF骨骼肌Wnt7a/Akt信号通路来改善CRF骨骼肌萎缩。其含药血清通过改变bcl-2/bax比值,上调抗凋亡蛋白bcl-2、pro-caspases-3、pro-caspases-8 的表达水平,并同时抑制 caspase-3和8的激活,激活Akt信号通路, 对C2C12细胞分化过程中由TNF-a导致的凋亡有抗凋亡的作用。其含药血清及有效中药单体藁本内酯、黄芪多糖、大黄素可有效调控恢复TNF-α诱导C2C12骨骼肌肌管萎缩Akt/mTOR信号,增大肌管横径,从而改善骨骼肌萎缩状态。