肝细胞和纤维母细胞的EMT/MET转化在肝脏纤维化转归中的作用及机制研究

肝脏纤维化的治疗是肝硬化和肝癌有效治疗的核心问题。肝细胞可以在病理状态下通过上皮-间质转分化的方式分化为纤维母细胞而参与纤维化形成，而我们的前期工作证实来源于肝脏纤维化组织的纤维母细胞可以在体外的条件下转分化为肝细胞。.本项目拟通过肝脏损伤修复和纤维化动物模型的建立，应用细胞示踪和多重免疫荧光技术观察纤维化肝脏内肝细胞与纤维母细胞在体内外的转分化，阐明肝细胞与纤维母细胞在肝脏纤维化和纤维化逆转中的关系；应用小干扰RNA技术和腺病毒载入技术观察体内外EMT关键调节蛋白E-cadherin和MET调节基因Cdc42和Rac1在肝脏纤维化中的治疗作用，深入研究肝细胞和纤维母细胞的相互转化在肝脏纤维化转归中的作用和机制；同时通过对肝脏内肝细胞和纤维母细胞相互转化的分子生物学机制的研究，确定肝脏纤维化治疗的分子生物学靶点，为肝脏纤维化的治疗提供新的思路和方法。

在本基金支持下，研究首先将来源于大鼠的骨髓干细胞绿色荧光蛋白(GFP)标记后注入到肝脏损伤模型的动物体内，再通过四氯化碳(CCl4) 注射建立肝脏纤维化模型，建立肝脏损伤后肝细胞再生动物模型，检测到肝细胞在肝脏纤维化时向纤维母细胞的转化，检测到E-cadherin促进EMT形成。然后，提取肝脏纤维化动物模型中的纤维母细胞，在体外环境下诱导向肝细胞分化，观察到相关细胞生长因子CDC42和Rac1可促进其分化。但是，目前利用上述建立的肝脏纤维化模型，在肝脏纤维化的病理状态下停止CCl4的应用而实现肝脏纤维化的自然消散后，观察到肝脏内GFP标记的纤维母细胞向肝细胞的转化时，体内检测结果仍然不稳定，有待下一阶段进一步研究。为进一步研究肝硬化的病理生理及其机制，在本基金支持下同时进行布加综合征引起的肝硬化的研究。应用下腔静脉缩窄术成功建立布-加综合征大鼠动物模型，进一步研究发现布-加综合征肝内外侧支循环的形成在其临床症状和体征中的代偿中发挥重要作用，肝内外侧支循环形成不但使患者的肝脏功能得以有效代偿并减轻临床症状和体征，而且对布-加综合征患者的治疗策略和方法的选择尤为重要，并由此提出了布-加综合征的病理生理学分型。临床方面，通过回顾性分析布加综合征合并肝脏结节患者的临床影像学资料，发现布加综合征合并肝脏结节的影像学表现尤其不同其他占位的特点。总之，在该基金项目支持下，研究了肝硬化的EMT/MET转化及部分机制，同时探讨了部分布加综合征相关肝硬化的临床及基础研究，取得了明显成果，但是在分子机制方面有待进一步研究。