莫西沙星致肝损害的大样本信息化安全性评价及其发生机制中免疫应答和基因多态性的相关性研究

Moxifloxacin is widely used and the incidence of liver injury caused by it is from 0.5% to 2.0% at abroad, domestic incidence is 4.7% reported by our team only. CFDA had warned moxifloxacin-induced liver injury twice. Because of the difficulties of acquiring enough samples timely and building animal models, the mechanisms of drug-induced liver injury (DILI) are still unclear. Immune responses and HLA genetic polymorphisms may play important roles in the process of DILI. Basing on the ADE intelligent monitoring system developed by ourselves, this research plans to construct an efficient reevaluation model for evaluating the post-marketing safety of moxifloxacin in the real world. With the combination of ADE intelligent system and nested case-control study, about 6000 patients with moxifloxacin will be monitored to obtain the incidence and related risk factors of moxifloxacin-induced liver injury. To analysis the function of delayed type hypersensitivity in the process of DILI and illuminate the immune mechanism of moxifloxacin-induced liver injury, blood samples will be collected in time and then immune indicators such as Th1,Th17 and CTL will be detected. Meanwhile through detecting HLA gene loci, immune mechanism will be validated furtherly and predisposing genes will be screened out, which could provide basis for genetic screening to prevent serious DILI.

莫西沙星使用广泛，国外大样本人群药源性肝损害（DILI）发生率为0.5~2.0%；CFDA已两次发布莫西沙星致DILI警示信息，而国内仅见本团队发生率4.7%的报道。囿于无法获取及时、足量临床病例生物样本，且很难建立动物模型，国内外至今尚未阐明DILI的发生机制；分析可能与免疫应答、HLA基因多态性有关。本研究利用自主研发的ADE智能监测系统构建高效精准的莫西沙星上市后药物安全性评价模式；采取前瞻性医院主动监测嵌套巢式病例对照设计方法，监测莫西沙星用药患者6000例，获取国人莫西沙星真实世界DILI发生率及相关风险因素；并实时采集发生DILI患者及对照组血样，检测Th1、Th17、CTL等免疫细胞及其细胞因子，分析Ⅳ型变态反应在DILI中的作用，阐明莫西沙星致DILI的免疫应答机制；检测HLA基因位点，进一步验证其免疫应答机制并筛选DILI易感基因，通过基因筛查预防严重DILI发生。

氟喹诺酮类药物（FQNs）抗菌谱广，临床应用广泛；国内外已有多个机构发出警示，提示关注FQNs潜在的致肝损伤风险。但由于无法及时获取足量临床病例生物样本，且很难建立动物模型，国内外至今尚未完全明确药物性肝损伤（DILI）的影响因素及发生机制。.本项目首先通过药品不良反应（ADR）自发报告挖掘和评价FQNs中相关DILI的风险信号，比较不同FQNs导致DILI的风险差异；然后基于药物不良事件智能监测系统（ADE-ASAS)，对使用FQNs的住院患者开展回顾和实时自动监测，比较DILI不同的生化诊断标准，并获取FQNs在国人住院患者中致肝损伤的发生率及相关风险因素；收集患者血样，检测相关免疫细胞及其细胞因子，筛选易感基因，分析免疫因素在该ADR中的作用机制。.本课题研究发现：在自发报告研究中，6种FQNs有肝损伤报告，其中莫西沙星和洛美沙星生成了阳性信号。仅莫西沙星用4种信号挖掘方法检测均生成了阳性信号，提示与其他FQNs相比，该药物与DILI的发生高度相关。.在不同生化诊断标准对比研究中，我们发现国际严重不良反应协会（iSAEC）标准与美国DILI协作网络（DILIN）标准的诊断结果具有一定一致性，但DILIN标准较严格、不利于早期干预，iSAEC标准更适合于DILI的临床诊断与研究。采用iSAEC标准深度分析，发现FQNs致肝损伤的发生率为0.653%，青年、男性、酗酒史、携带乙肝病毒和合并使用头孢菌素或碳青霉烯类药物可能会增加FQNs致肝损伤发生风险。.在进行实时监测研究期间，收集到FQNs致肝损伤患者血样10例，对照患者20例。检测免疫细胞发现病例组血样中CD4+辅助型T细胞（Th细胞）百分比显著高于对照组患者，其中Th22的百分比也显著升高，提示Th22细胞在免疫损伤及DILI的发生发展中发挥着重要作用。运用ELISA法对多种细胞因子进行检测，未发现病例组和对照组之间细胞因子表达水平差异具有统计学意义。通过对病例组和对照组患者进行HLA基因分型研究不同HLA等位基因的分布情况，未发现分布具有显著差异的相关基因。.本研究中期因受相关政策影响，实时监测的目标药物莫西沙星的临床使用人群显著减少，调整为所有在院使用的FQNs（进展报告中已说明）后，效果仍然有限。考虑可实时监测所有DILI相关药物，以及时获取足量临床病例生物样本，进而深入研究DILI的发生机制。