IL-27在动脉粥样硬化进程中的作用及免疫学机制研究

IL-27 is a recently identified heterodimeric structure of cytokine, the receptor of which is mainly expressed on activated CD4+ T cells, and the binding of them can activate JAK/STAT pathway, inhibiting Foxp3+ Tregs and promoting Th1 cells immune response. LAP+ T cells is the newly discovered Tregs subset distinguished from foxp3+ Tregs. In our preliminary experiments, we found that the level of IL-27 was upregulated significantly in CAD patients and AS mice compared with control, IL-27 suppressed the generation and function of LAP+ Tregs, but the exact mechanism remains unknown. We speculate that the suppression of Tregs and AS process can be regulated by intervention of IL-27. To confirm the hypotheses, we plan: 1.Dynamically observate the variation of IL-27 in the mouse AS process, investigate the generation and function change of Tregs and Th1 by blocking and enhancing IL-27 effects in vivo; 2.Stimulate LAP+ Tregs with different concentrations of IL-27 in vitro,and detect the STAT phosphorylation level and the secretion amount of related cytokine. In this study, we may clarify the role of IL-27 in the AS process,and further improve IL-27-mediated immunological mechanism.

白介素27（IL-27）是一种近年鉴定的异二聚体结构类细胞因子，其受体主要表达于活化的CD4+T细胞，它与受体结合诱导活化JAK/STAT通路，抑制Foxp3+调节性T细胞（Tregs）和促进1型辅助性T细胞免疫反应。LAP+T细胞是一种最新鉴定的不同于Foxp3+的Tregs亚型。我们的预实验表明，冠心病患者及AS小鼠体内IL-27水平显著升高，IL-27抑制LAP+Tregs的产生和功能，但具体机制尚不清楚。我们推测，干预IL-27可调控Tregs的功能及AS进程。为证实该假说，拟：1，动态观察小鼠AS进程中IL-27变化规律,通过阻断和增强IL-27效应，探讨体内Tregs的产生和功能变化及AS的影响；2，不同浓度IL-27刺激LAP+Tregs，检测细胞内STAT磷酸化程度及相关细胞因子水平。通过本研究不仅阐明IL-27在AS进程中的作用，并可进一步完善IL-27介导的免疫学机制。

此项研究中，我们首先研究了IL-27在AS早期，对于AS的形成过程中，起到的作用。将ApoE-/ -小鼠分为IL-27处理组(A组)、IL-27p28处理组（B组）、PBS处理组（C组），进行腹腔注射。从八周龄起，处理持续两个月，期间继续给予高脂饮食。处理后，处死取血、脾脏、主动脉行流式细胞学以及相应形态学检测。结果表明：给予重组IL-27，可以延缓动脉粥样硬化斑块的形成。相反，给予IL-27p28抗体会加重动脉粥样硬化的程度。流式细胞学结果显示，外源给予IL-27的小鼠，Foxp3+以及LAP+Treg细胞比例较高，Th1、Th2、Th17比例较低，外源给予IL-27p28抗体组得到相反的结果：Foxp3+以及LAP+Treg细胞比例较低，Th1、Th2、Th17比例较高。为了研究IL-27对已形成动脉粥样硬化的小鼠的作用，对从六周龄起，喂食高脂饮食八周的ApoE-/ -小鼠分别进行腹腔注射IL-27（D组）、IL-27p28抗体（E组）、PBS（F组）。干预八周后处死，取血、脾脏、主动脉行流式细胞学以及相应形态学检测。结果表明：外源给予重组IL-27，可以相对减轻动脉粥样硬化的程度。相反，外源给予IL-27p28抗体会加重动脉粥样硬化的程度。流式细胞学得到了与A、B、C组相似的结果，外源给予IL-27的小鼠，Foxp3+以及LAP+Treg细胞比例较高，Th1、Th2、Th17比例较低，外源给予IL-27p28抗体组得到相反的结果：Foxp3+以及LAP+Treg细胞比例较低，Th1、Th2、Th17比例较高。.我们的研究表明：IL-27可诱导ApoE-/-小鼠CD4+LAP+ Tregs和CD4+CD25+Foxp3+Tregs生成，进一步抑制炎症反应，降低Th细胞比例，从而缓解动脉粥样硬化的发生发展。希望本研究为AS的预防或治疗提供理论依据。