林区蜱及蜱传疾病流行规律的研究及其数据库的构建

Tick and tick-borne diseases is one disease of natural focus which relate closely with geographical environment and climate，and stand long in some area. Investigation and classification tick kinds in Wondersun forest in Heilongjiang province using PCR and other methods to finish a epidemic investigation on tick-borne diseases, especially on tick-borne zoonosis, the methods of molecular biology and morphological to analyze biology relation among tick, tick-borne diseases, host and environment to reveal the spread regularity of tick and tick-borne diseases. One of the eventual goals of this work is the development of the datebase and relevant emergency preplan in these regions. The work makes its available to control and prevente the diseases, also effective to response public health emergencies caused by ticks. Meanwhile it provides material reserve for the further study on tick and tick-borne disease.

蜱是一种吸血的外寄生虫，它能携带病原体在宿主之间传播，其中大多数是重要的人兽共患病原。近年，蜱传人兽共患病发生呈上升趋势，已经对我国公共卫生造成严重危害，引起了人们的恐慌，影响了社会稳定。蜱及蜱传疾病是一类自然疫源性疾病，与地理环境和气候季节关系密切，在某一地区长期存在。本研究拟应用分子生物学和形态学方法对黑龙江省完达山林区进行蜱的系统调查和分类；应用PCR等方法进行蜱传疾病，尤其是蜱传人兽共患病的系统调查和研究。进一步分析蜱、蜱传疾病、宿主和环境之间的生物学联系，揭示蜱及蜱传疾病的生物学特性和流行规律。初步在这些林区建立蜱及蜱传疾病的数据资料库，并制定相应的预防和应急预案，为更大范围的研究提供参考。本研究有利于有效地控制和预防蜱及蜱传疾病，有利于有效应对由蜱传人兽共患病引起的突发公共卫生事件，同时也为进一步开展蜱及蜱传疾病的深入研究奠定基础。

通过三年的研究，项目申请者亲自采集了大量的样品，并获得了一定的研究成果，现总结如下：（1）完达山蜱分布的规律的研究。主要分布蜱有3个属，分别是革蜱、血蜱和硬蜱。其中革蜱主要是森林革蜱或草原革蜱，血蜱主要为嗜群血蜱和日本血蜱，硬蜱主要为全沟硬蜱。分布情况跟时间和环境密切相关。（2）森林革蜱的线粒体研究。本研究首次对森林革蜱线粒体的全基因组进行测序，森林革蜱线粒体基因组全长为14945 bp，由13个蛋白质编码基因、2个非编码区、22个tRNA和2个核糖体RNA构成，各基因排列顺序与后沟类硬蜱相似。 (3)革蜱的多态性分析。探索中国4个地区线粒体基因组4个基因在革蜱中的变异率。表明不同个体的革蜱的基因之间存在一定的差异。 (4) 完达山林区伯氏疏螺旋体在蜱中的携带情况。对1170不同种类的蜱进行了检测，其中伯氏疏螺旋体不同蜱中的携带率有一定的规律，全沟硬蜱的携带率最高达到了22.18%（165），革蜱和血蜱的携带率相对较低9.43%（23）和8.24%（15）。(5)完达山林区立克次体在蜱中的的携带情况。在立克次体的检测中发现，该类病原的感染率较高，其中在革蜱中对的感染率可达95%以上，其他蜱种的感染率也不低于50%，是一类感染最高的蜱传病原，建议进行深入研究。(6)初步建立了蜱采集及统计数据库的结构单元。包括：编号、收集时间、省份、市/县、详细地点、地形、植被、纬度、经度、海拔（米）、动物或游离、小瓶管代码、蜱的数量/瓶、蜱的种类、蜱的性别、蜱的发育阶段等。(7)蜱叮咬后的摘除。人被蜱叮咬，摘除的最好的方法是用弯头镊子尽可能靠近皮肤夹住蜱，用稳定向上的力进行提拉摘除，如果没有镊子也可以用手摘除，原则是越早摘除越好。（8）部分检测引物不适合蜱中病原的检测。包括：布氏杆菌Sanjay的方法; 鼠疫杆菌卫生部颁布的诊断标准中的PCR方法; 斑点热群立克次氏体的检测方法; 用于泰勒虫引物P1和P2。通过本研究获得了多种病原，掌握了第一手资料，积累了经验为进一步研究奠定了基础。