新疆蜱传原虫病分子免疫流行病学研究

新疆具有养殖牦牛的广阔高山草原，牦牛又是我区特色畜种，由于新疆境内分布的蜱种类约占全国的2/3，而其引起的蜱传原虫病长期制约牦牛业的发展，阻碍高原牧区人们脱贫致富之路。目前,对蜱传原虫病的诊断仍用镜检法，由于循环血染虫率低或相似虫体鉴别难等原因，易造成漏诊和误诊，而血清学诊断法存在着抗原敏感、特异性差等问题。本项目通过运用现代分子免疫学检测法来弥补常规检查法，以《巴州牦牛疫病防治研究》和日本《高级原虫病研究》为前期工作基础，调查研究媒介蜱及蜱传原虫病。对牦牛泰勒虫、巴贝斯虫病进行DNA和基因型分析，建立地方虫株体外培养技术。优化血清学诊断方法，引用PCR和实时荧光定量PCR技术，从而提高检出率。鉴定媒介蜱，全面了解蜱传原虫病的感染率、感染强度、流行特点等，以此流行病学参数正确估计危害，阐明防治重点，拟定综合防治规划。为建立分子免疫诊断体系和综合防治牦牛疫病提供科学依据和技术支撑。

牦牛是新疆特有畜种，然而由于我区牦牛饲养的生境特殊和蜱虫种类繁多，蜱虫害及蜱传原虫病长期制约新疆牦牛业的发展。本项目以新疆牦牛原虫病和蜱虫害为研究对象，课题组行程数万公里，考察三十余牧场的牦牛群及其不同生境（高山、草原和戈壁等）的蜱虫，调查研究牦牛媒介蜱虫及其梨形虫的种类、感染率及其地方流行特点等，同时研发蜱传原虫病新型检测技术并用这些技术进一步进行蜱传原虫病的流行病学调查。课题组完成了项目计划内容，取得成果总结如下。（1）证实新疆优势分布的硬蜱包括革蜱、璃眼蜱、扇头蜱、血蜱、牛蜱和硬蜱等6个属，广泛分布于山区草原和荒漠型植被区域。（2）鉴定出新疆牦牛优势种蜱4属14 种和蜱传原虫2属3种；我区牦牛优势蜱种包括银盾革蜱、森林革蜱、草原革蜱、高山革蜱、巴氏革蜱、小亚璃眼蜱、亚东璃眼蜱、残缘璃眼蜱和微小牛蜱等；其感染率为革蜱属35%～50%，璃眼蜱属20%～30%，血蜱属15%～20%和牛蜱属0～10%；其出没规律为每年的2～7月，9月还有个小高峰，期间均传播疾病。（3）鉴定归类牦牛体内滞留寄生虫，并获得了1种吸虫、12种线虫、4种绦虫、5种原虫等，隶属于4门、7纲、8目、13科和20属，该研究成果填补了在教学和科研中关于牦牛寄生虫方面的空白。（4）获得了牛环形泰勒虫和巴贝斯虫地方流行虫株，在家兔和小鼠完成了在体殖虫试验并保存了地方虫株。（5）初次建立了牛巴贝斯虫新疆虫株的离体培养技术（包括温度和气体等培养条件以及培养基、胎牛血清和牛红细胞的配制方法）、保存和复苏的操作规程，为相关科研提供了虫体实物材料。（6）研发了“牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法”、“牛巴贝斯虫荧光PCR检测方法”和“牛环形泰勒虫新疆株Tams1重组抗原ELISA检测方法”等，这些新型检测技术均适用于牦牛蜱虫及蜱传原虫病的早期诊断、检疫和流行病学研究。（7）利用我们建立的新型检测技术进一步对新疆牦牛蜱传原虫病进行了较具体的流行病学调查，结果表明：牦牛梨形虫病总感染率为29～84%，而牛环形泰勒虫（19～54%）、牛双芽巴贝斯虫（2～10%）和牛巴贝斯虫（8～20%）均呈混合感染。（8）课题组发表了中文核心期刊论文10篇，培养6名硕士研究生和5名基层技术人员。本项目研究成果可为我国新疆蜱虫及蜱媒病危害、风险评估和综合防控提供科学依据。