缺氧诱导因子-1α在肝癌血管生成拟态形成中的作用及蜂毒素干预实验研究

血管生成拟态（VM）形成与肝癌复发转移、预后差有关，具体机制尚未清楚。缺氧诱导因子1-α（HIF-1α）作为缺氧的主要效应分子在黑色素瘤等多种肿瘤VM形成中具有重要作用，但HIF-1α在肝癌VM形成中的作用并不清楚。前期研究显示，蜂毒素具有抗肝癌血管生成和侵袭转移等作用，而且有研究提示可通过抑制HIF-1α而抑制骨肉瘤鼠模型VM的形成，但蜂毒素是否可通过干预此靶点抑制肝癌VM形成也不清楚。因此，本项目拟通过观察不同HIF-1α表达状态下三维培养肝癌细胞MHCC97-H、HepG2和肝癌裸鼠荷瘤模型VM形成情况，并以蜂毒素进行干预，分别检测HIF-1α相关靶分子（VEGF、bFGF、MMP2、MMP9等）和上游调控分子NF-κB的表达水平，探讨HIF-1α在肝癌VM形成中的作用及蜂毒素的影响，并了解其可能机制，为寻找抑制肝癌复发转移的新靶点和进一步明确蜂毒素抗肝癌机制提供实验依据。

根据研究计划，本研究观察了缺氧对肝癌细胞侵袭转移等生物学特征和血管生成拟态（VM）形成的影响及蜂毒素的干预作用，缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在肝癌荷瘤裸鼠肿瘤中的表达及其对肿瘤生长、VM形成的影响和蜂毒素的干预作用，并探讨蜂毒素的作用机制。在项目的具体实施中，我们为了取得稳定的细胞培养模拟缺氧状态，以使用氯化钴（CoCl2）代替三气培养箱缺氧培养。本研究通过分析HIF-1α表达状态与肝癌VM形成的关系，验证了文献所报道肝癌存在VM现象，而且为缺氧参与肝癌VM形成机制提供了实验依据；通过观察蜂毒素对HIF-1α表达和肝癌VM的影响，提示蜂毒素可能通过抑制HIF-1α而干预肝癌VM的形成，为进一步明确蜂毒素抗肝癌机制提供依据，也提示HIF-1α表达状态可能是影响肝癌侵袭转移的新靶点，值得进一步深入研究。