基于调控单核-巨噬细胞分化的黄连解毒汤抗动脉粥样硬化研究

传统观念认为动脉粥样硬化(As)是血管局部炎症，新近发现：As是多种免疫细胞异常导致的全身免疫紊乱；单核和巨噬细胞均具有促进和抑制炎症两个亚群，在As发生发展过程中，外周血单核细胞和斑块内巨噬细胞的分化方向均倾向于炎症型。提示As发生与单核-巨噬细胞异常分化密切相关。因此，采用药物纠正单核-巨噬细胞异常分化是治疗As的新策略。我们前期发现：黄连解毒汤可降低As患者和感染模型小鼠的外周血单核细胞炎症型亚群比例。由此提出假说：黄连解毒汤抗炎和抗As作用可能与纠正单核和巨噬细胞异常分化方向有关。本项目突破固有模式，拟以单核-巨噬细胞亚群为切入点，关注As免疫功能异常的细胞学基础，复制As小鼠模型，动态观察黄连解毒汤纠正单核-巨噬细胞异常分化的作用，从细胞表型和免疫功能角度阐明该方剂的药理机制，为黄连解毒汤治疗As提供实验依据。

本项目从在体动物模型和离体细胞模型两个层面，展开对高脂血症/动脉粥样硬化免疫功能异常的研究，及黄连解毒汤纠正单核-巨噬细胞的分化异常的研究。体内研究采用apoE-/-小鼠辅以高脂饮食，复制动脉粥样硬化小鼠模型，通过黄连解毒汤干预模型动物。从血脂水平、血浆细胞因子的水平、外周血单核细胞及其亚型比例，以及其表面受体TLR4和CD36 的表达;主动脉病理变化和主动脉血管局部M1型和M2型因子表达水平，验证了黄连解毒汤抑制全身和血管局部炎症反应，抑制动脉粥样硬化，结果还表明黄连解毒汤对于高脂血症治疗作用不依赖于降脂，而是通过免疫调节作用。体外研究采用代表高脂血症∕动脉粥样硬化发生过程中三个不同分化阶段的单核-巨噬-泡沫细胞模型，通过黄连解毒汤含药血清对不同分化阶段的单核-巨噬-泡沫细胞分化方向的影响，证明黄连解毒汤含药血清在多个阶段影响单核-巨噬细胞的免疫极性,促进M2型巨噬、泡沫细胞分化，从而减缓、抑制高脂血症引发的动脉粥样硬化发生、发展。这些结果证实了我们提出的“黄连解毒汤抗炎和抗动脉粥样硬化作用可能与纠正单核和巨噬细胞异常分化方向有关。” 假说，为黄连解毒汤治疗动脉粥样硬化提供实验依据。