光损伤线粒体DNA突变谱对核基因组的逆向调节作用探讨

光损伤诱导谱性分布多种类型的mtDNA突变在光老化皮肤及暴露部位皮肤肿瘤中大量累积，其生物学效应仍有待进一步阐明。本项目拟以聚乙二醇为促融剂，将模拟日光照射产生线粒体DNA损伤的血小板与无线粒体DNA的ρ 206细胞进行融合实验，构建光损伤相关mtDNA突变的转线粒体细胞系，采用自动化的荧光mRNA差异显示技术克隆光损伤相关mtDNA突变细胞系与正常mtDNA细胞系差异性表达的核基因，探讨以光损伤相关mtDNA突变谱作为外源因素对核基因组的逆向调节作用及其可能的机制，本项目将光损伤相关mtDNA突变作为一个整体进行研究，同时完全排除了光损伤对核基因组及胞浆内其他因素的直接作用的干扰，有望为探讨mtDNA突变在光损伤中的作用及机制提供新的模型，为防治皮肤光老化及光损伤相关皮肤肿瘤寻找新的作用靶点，并为进一步探讨线粒体DNA与核DNA的相互作用提供新的思路。

皮肤光老化是目前的研究热点，目前其机制尚不清楚。光损伤诱导谱性分布多种类型的mtDNA突变在光老化皮肤及暴露部位皮肤肿瘤中大量累积，其生物学效应仍有待进一步阐明。. 本项目首先通过光损伤诱导血小板mtDNA突变的实验研究，初步明确模拟日光可诱导血小板出现光损伤mtDNA突变，进一步摸索模拟日光照射的最佳剂量及血小板的培养条件，为顺利构建光损伤相关mtDNA突变转线粒体细胞系做好准备；其次以聚乙二醇为促融剂，将模拟日光照射产生线粒体DNA损伤的血小板与无线粒体DNA的ρ°206细胞进行融合实验，成功构建光损伤相关mtDNA突变的转线粒体细胞系;最后采用mRNA差异显示技术克隆光损伤相关mtDNA突变细胞系与正常mtDNA细胞系差异性表达的核基因，探讨以光损伤相关mtDNA突变谱作为外源因素对核基因组的逆向调节作用及其可能的机制。. 本项目将光损伤相关mtDNA突变作为一个整体进行研究，同时完全排除了光损伤对核基因组及胞浆内其他因素的直接作用的干扰，有望为探讨mtDNA突变在光损伤中的作用及机制提供新的模型，为防治皮肤光老化及光损伤相关皮肤肿瘤寻找新的作用靶点。本项目再次证实突变线粒体DNA的累积是导致皮肤光老化和皮肤肿瘤的重要机制，为光老化和暴露部位皮肤肿瘤的防治提供了重要理论依据。. 项目的研究成果体现在以下几方面：1、成功构建血小板介导的光损伤相关mtDNA突变转线粒体细胞系，为探讨mtDNA突变在光损伤中的作用及机制提供新的模型，为防治皮肤光老化及光损伤相关皮肤肿瘤寻找新的作用靶点，并为进一步探讨线粒体DNA与核DNA的相互作用提供新的思路。2、初步探明光损伤mtDNA突变谱对核基因组逆向调节作用可能的效应基因，发现ROS作为第二信号系统在光损伤mtDNA突变谱生物学效应可能基于中心作用。. 本项目按合同书要求的计划进行，执行情况良好，经费使用合理，已于国家统计源以上刊物发表论文6篇，SCI文章1篇，培养了1名博士研究生、2名硕士研究生，达到了预期研究目标。项目数据完整，结果可靠，结论可信，达到国内同类研究的先进水平，符合结题条件。