皮肤源性干细胞向神经细胞分化调控机制的研究

各种原因引起的髓鞘缺失或损伤病变可导致严重的感觉、运动功能障碍。研究证实，皮肤源性干细胞（Skin-Derived Precursors， SKPs）分化形成的雪旺细胞能够有效的在外周及中枢神经中形成新的髓鞘结构。但由于SKPs纯化困难，目前尚无对SKPs的分化调节的研究报道，这对SKPs的临床应用研究形成了阻碍。本实验室在国内外首次成功分离了富含干细胞的SKPs侧群细胞，我们发现其向神经细胞分化过的程可能受众多因素的影响。本课题中，我们利用现有成果，建立具有临床实用价值的SKPs分离收集方法；在此基础上分析SKPs在体外环境中向神经细胞（神经元、雪旺细胞）分化过程中的详细调控机制；并建立细胞移植模型，探讨影响移植细胞生物学行为的各类内源性及外源性因子。本课题的意义在于为SKPs的临床应用奠定了技术基础；填补了国内外SKPs调控研究领域的空白；为髓鞘损伤疾病治疗的研究提供了新的平台。

本研究目的为通过流式细胞术与侧群细胞方法在皮肤来源前体细胞球中分离具有真正干细胞特征的皮肤来源前体细胞球侧群细胞（Skin Derived Precursor Spheres-Side Population, SKPS-SP），并在此基础上对SKPS-SP向神经细胞方向分化调控的机制进行深入研究。我们通过流式细胞术成功分离SKPS-SP，并优化了其分离收集方案。通过基因芯片技术，我们对SKPS-SP细胞的分子生物学特征鉴定，发现其具有干细胞特征。进而，我们采用PCRarray技术对SKPS-SP在分化过程中的信号通路表达变化情况进行了初步分析，我们发现一些经典信号通路在其中可能起着作用。在此基础上，我们采用了Wnt信号通路调节剂，对其在SKPS-SP细胞向雪旺氏细胞方向分化的过程中的作用进行检验，随即发现Wnt抑制剂可以使SKPS-SP处于未分化状态，并且对于其他信号通路的表达也起着调节作用。因此，我们认为SKPS-SP细胞为真正的皮肤来源前体细胞，其具有干细胞特征，并初步推测在SKPS-SP分化调节网络中Wnt信号通路起着至关重要的作用。