MYH基因变异介导糖尿病肾病的线粒体机制研究

糖尿病肾病-DN是糖尿病最常见的并发症，严重危害人类健康，探讨发病机理、提高诊治水平刻不容缓。研究证实，遗传因素是DN发病的关键因素之一。.我们首次报道碱基剪切修复基因MYH的T/A变异，并提示为DN候选变异。该变异位于线粒体信号肽区，影响产物进入线粒体；而MYH作为DNA氧化损伤修复的重要组分，结果引起线粒体DNA氧化损伤累积，参与糖尿病引发的肾脏损害。本课题在前期基础上，利用MYH-/-小鼠，及分子克隆和离、在体转染等技术，构建线粒体MYH缺失、变异和高表达、变异高表达的细胞及动物，分析线粒体MYH表达不同对高糖损伤足细胞和STZ诱导糖尿病鼠的影响。进一步评估临床患者的氧化损伤，结合不同基因型及与对照间的比较，明确基因变异与疾病发生发展的关系。从基础到临床，体内、体外相结合，探讨MYH基因变异、线粒体DNA氧化损伤与DN发病的关系及机制，加深对DN的认识，有助于筛查高危人群和早期诊治。

糖尿病肾病是糖尿病最常见的并发症，严重危害人类健康，探讨发病机理、提高诊治水平刻不容缓。研究证实，代谢和遗传等因素与糖尿病肾病发病的密切相关。.我们首先利用中国的糖尿病肾病人群，证实了该组患者中肥胖的分布特征，以及肾脏损伤的特征，并指出肥胖会加重糖尿病肾病早期的肾脏损伤，而随着糖尿病进展，体重过轻则是肾脏预后不良的指征。我们同时建立了高分辨溶解曲线高通量基因多态性的分析体系，并开展了MYH基因变异的筛查。病例对照研究显示，MYH基因的AluYb8MUTYH变异显著增加了2型糖尿病的发病风险。与对照组相比，突变P 等位基因在2型糖尿病人群中的比率显著增加。c.972 GG 和 AluYb8MUTYH 显著增加了慢性肾功能障碍的发病风险；而对于携带有hOGG1 c.977GG的患者而言，若同时合并有MUTYH基因的c.972 GG (OR=2.23, P=0.001) 和 AluYb8MUTYH变异则进一步增加了疾病的发病风险。进而分析证实，MYH的变异与外周血DNA氧化损伤的累积，以及机体的炎症状态密切相关，继而参与增加了疾病的风险。. 在此基础上，我们利用db/db小鼠模型，证实游离脂肪酸结合蛋白3(FABP3)与肾脏损伤的关系，结合激光共聚焦和免疫电镜等手段，提出足细胞病变的途径及与蛋白尿的关系。我们利用Apoe–/–KitW-sh/W-sh小鼠，构建腹主动脉瘤模型，研究肥大细胞以及炎症与疾病的关系。证实，肥大细胞趋化炎症细胞的作用，参与了疾病的发生、发展，而炎症的增生以及损伤细胞的凋亡参与了这一过程。最后我们利用MYH-/-小鼠，证实MYH参与了肾脏纤维化的发生发展；而MYH缺陷对于肾间质纤维化的进展有着显著的保护作用，纤维化明显显著减少。. 进而，我们利用体外细胞模型，证实MYH基因与线粒体功能以及功能障碍的关系。MYH基因变异增加了线粒体DNA (mtDNA)的复制，增加了JC-1的表达，降低了线粒体膜电位，使得线粒体的功能下降，提示该变异增加了线粒体的负荷，并且呈现随年龄增加的显著趋势。. 研究从基础到临床，体内、体外相结合，探讨MYH 基因变异、线粒体DNA 氧化损伤与疾病发生的关系及机制，有助于筛查高危人群和早期诊治。共发表相关SCI论文7篇（已标注），培养博士2名（已毕业），硕士2名（在读中）。对这一问题的深入探讨仍在继续中。