黄瓜绿斑驳花叶病毒种传机制及黄瓜抗性基因的筛选

Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) have been causing serious yield losses on cucumber (Cucumis sativus L.) and other species of gourd family Cucurbitaceae worldwide in recently years, decreasing the value of market, and direct to threaten the production of cucumber. In previous study of host-CGMMV interaction, CGMMV was confirmed that it could be transmitted by pollen from CGMMV-infected to CGMMV-free plants in greenhouse, as well as to the offspring seedlings. The project based on the previous study will fix cucumber as the host plant, to probe: 1)the relations between the CGMMV spreading and CGMMV-infected pollen, 2)the location and distribution of the virus in cucumber seed, 3)the dynamic distribution and transport activities of the virus during cucumber seed germinating, 4)clear known the mechanism of cucumber pollen transmission. The expected results will provide with both theoretical and practical significance, and direct evidence for the future research of the spreading and epidemiology of CGMMV disease..Note: According to the opinions from evaluation experts and the approved actual resaerch grants, the project will adjust research contents, include to cancel the research about screening the potential resiatance target genes of CGMMV disease.

黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaicvirus，CGMMV）是世界范围内的检疫性植物病毒。近年来，该病毒引起的病害在多个国家和地区之间迅速传播，造成严重经济损失。本项目在前期CGMMV与寄主互作、确证感染CGMMV的黄瓜植株可通过花粉并病毒传递到健康植株、同时带毒种子可以将病毒传递到后代实生苗的研究基础上，以黄瓜为寄主作物，拟系统研究：1）CGMMV传播与花粉带毒的关系，2）CGMMV在种子中的定位和分布，3）CGMMV在种子萌发过程中的动态分布和运输机制进行系统研究，4）CGMMV的种传机制，预期结果将为该病害的传播及流行学研究提供直接证据，具有理论和实际意义。.注：根据评审专家意见和小额资助实际，将取消黄瓜抗性基因的筛选部分工作。

黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV）是近年来传入我国的一种典型的种传有害生物，它寄藏于种内且可长时间存活并随种子远距离传播，对葫芦科作物安全生产及其经济价值带来严重威胁，因此探究CGMMV随种子传播的机制对该病毒病的综合防控具有重要意义。本项目围绕CGMMV的传播及其与寄主的互作行为展开研究，获得了以下结果：.1）黄瓜花粉在CGMMV传播过程中的作用：通过人工授粉的方法证实CGMMV可伴随花粉通过人工授粉的方式进行传播，造成健康植株的系统侵染，通过检测其种子证实花粉的传播率为17.1 % - 51.2 %；通过检测阳性种子播种后的幼苗（3叶真叶期），证实CGMMV可通过种子传播至下一代幼苗，传播率为12.8 % -76.7 %。另外，证实了苗期（3叶真叶期）即接种CGMMV 成功的黄瓜植株，通过自花授粉后，其种子带毒率为33.3 %-100 %，通过检测阳性种子播种后的幼苗（3叶真叶期），其带毒率为16.7 % -100 %。.2）CGMMV在种子中的定位和分布：选取葫芦种子种子表面、外种皮、内种皮、种胚、子叶及未成熟的幼种，One step RT-PC检测结果表明，子叶呈阴性，其余各部位均为阳性；子叶研磨液接种健康黄瓜植株叶片，检测仍然呈阴性。带毒种子的种胚免疫荧光染色观察显示，CGMMV在种胚中沿着生长锥分布；种子在形成过程中CGMMV侵入种子胚内造成感染。.3）CGMMV在种子萌发过程中的动态分布和运输：应用One step RT-PCR方法对葫芦种子萌发过程的根伸长、下胚轴伸长、真叶三个阶段单株培养的幼苗进行研究，结果表明CGMMV在种子萌发植株的根、下胚轴、真叶中均有分布；本研究条件下CGMMV随种子萌发成为幼苗的传毒率为100%。