采用双脱氧终止法进行TGFβ全长CDNA的序列分析,在测序中应用缺失突变体技术,并解决了碱基压带现象。改造了TGFβ基因的5′和3′非翻译区,分别克隆了两个TGFβ真核表达载体,PCMVβ和PSVLβ,核酸分子杂交和蛋白活性测定表明,转染TGFβ基因的COS-7细胞有TGFβ的转录和重组蛋白的产生。PCR克隆了TGFβC端成熟肽的编码基因,以温度诱导方式和分泌型方式进行了表达研究,结果表明,TGFβ成熟肽可以在Ecoli中实现表达。本研究工作为双体形式的多肽生长因子在原核细胞中的表达奠定了基础,有重要的理论和实用意义。
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数据更新时间:2023-05-31
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