MBL对抗原提呈细胞早期分化的调节作用及其机制

我们最近发现，甘露聚糖结合凝集素（MBL）可抑制单核细胞（Mo）向树突状细胞（DC）分化而诱导Mo分化为常规巨噬细胞（s-MΦ)和类成纤维细胞的MΦ（f-MΦ）。据此提出本项目，拟就MBL（包括3种突变MBL蛋白）对Mo向2种MΦ分化过程进行以下研究：①形态和表面标志；②功能包括吞噬活性、细胞毒活性、产生细胞因子、抗原提呈与获得性免疫应答；③有关机制包括细胞因子的作用、信号转导通路；同时研究MBL对常规诱导培养中DC信号通路的影响。其创新点和意义在于：①提出MBL通过调控抗原提呈细胞（APC）分化而参与获得性免疫应答的新观点，将丰富天然免疫指导获得性免疫应答的基础理论，并为MBL失衡和APC功能紊乱有关疾病的防治提供新的理论依据和靶点。②从免疫调节功能紊乱这一全新的角度阐述MBL缺损的发病机理，为其诊治研究提供新的依据和策略。③揭示2种不同形态MΦ的标志与功能，为对其深入研究开辟新的途。

甘露聚糖结合凝集素（MBL）在天然免疫中起重要作用，但关于起与免疫细胞之间的相互作用及其后果所知甚少。本项目研究了MBL对单核细胞（Mo）向巨噬细胞（MΦ）和树突状细胞（DC）早期分化、增殖的影响及其机制。低浓度MBL（2.5μg/ml）促进Mo向梭形MΦ（f-MΦ）分化，而高浓度MBL（20μg/ml）使Mo分化为常规MΦ（s-MΦ)，并影响其表面分子HLA-DR、CD86和CD206及细胞因子如IL-10、TGF-β、IL-12、IL-6、TNF-α表达，表明MBL可诱导人Mo向M2c型MΦ分化；MBL不影响MΦ的吞噬功能，但降低MΦ刺激同种异体T细胞增殖的能力。MBL对Mo的增殖具有双向作用，低浓度MBL（4 μg/ml）促进Mo增殖，而高浓度（4-20 μg/ml）则抑制其增殖。这种增值抑制作用的机制一是MBL阻滞细胞于G0/G1期，而这与p21基因上调和CyclinDl、CyclinD3、CDK2、CDK4基因下调有关；二是MBL能诱导细胞凋亡，与Caspase-3、Fas基因上调和Bcl-2基因下调有关；而这些又是通过TGF-β1和p38 MAPK信号途径介导的。而且，2型糖尿病人血清MBL水平和Mo的Fas、caspase-3、p21和p27 mRNA 表达明显增高，但CyclinD1、cdk2和cdk4 mRNA表达显著下调。在Mo向DC早期分化过程中，MBL可使细胞表面CD1a表达降低，分泌IL-10和IL-6增多，能抑制T细胞增殖。DC前体细胞中STAT5和JNK活性减弱但激活STAT3；还发现MBL抑制ERK的磷酸化。表明MBL可能通过抑制Jak2/STAT5信号途径而阻断Mo向DC分化。还发现高浓度MBL可抑制LPS-诱导的DC和THP1细胞成熟和促炎细胞因子（如IL-12和TNF-α）表达，抑制DC活化异体T细胞的能力，并从MBL结合细胞的Ca2+依赖性、减弱LPS结合DC及其在LPS诱导下的NF-κB活性等方面初步研究了MBL作用的机制。所有资料表明，高浓度MBL可诱导人Mo向M2c型MΦ分化、抑制Mo增殖、抑制Mo向DC的早期分化及其继续分化成熟，提示MBL可能在某些病理情况下具有抗炎作用并间接调节获得性免疫应答。