循环肝癌细胞高转移亚群的分离及其差异表达蛋白的鉴定

肝癌转移以血行播散为主。目前尚未见直接针对循环肝癌细胞分析差异表达蛋白的研究报道，而从循环肝癌细胞中分离、鉴定高转移细胞亚群也是一个挑战。本课题首先建立半乳糖磁珠细胞分选技术，从肝癌患者血液中分离循环肝癌细胞，应用克隆形成试验和裸鼠接种筛选高转移细胞亚群，然后以显微切割的原发瘤肝癌细胞等为对照，应用蛋白指纹图谱技术分析高转移性循环肝癌细胞蛋白质组图谱的改变，鉴定差异表达的蛋白，最后应用多种方法在大样本肝癌组织标本上对少数几个最有期望价值的转移相关分子进行验证。期望通过研究，探究循环肝癌细胞的产生是一个随机性被动脱落事件还是一个伴随某些分子生物学特性改变的选择性主动脱离事件，明确循环肝癌细胞在整个转移过程中的地位，发现可用于检测和干预肝癌转移复发的靶标。建立的循环肝癌细胞分离方法不仅可用于检测循环肝癌细胞的临床意义的评价，而且将成为一个新的技术平台，促进肝癌基础和临床研究的发展。