和解利湿法治疗酒精性慢性胰腺炎的实验研究

慢性胰腺炎（CP）是一种慢性难治性消化系统疾病，酒精是CP的主要病因。鉴于中医药对该病治疗的特色优势，开展中医药防治CP的深入研究具重要意义。本课题在既往临床实践和实验研究证实柴胡桂枝汤有理想的防治CP作用，并可以通过抑制TGF-β诱导的胰腺纤维化防治CP，以及茵陈蒿汤能够改善实验性胰腺炎的胰腺功能和胰腺组织的病理改变的基础上，结合TGF-β-Smad-ERK通路激活胰腺星状细胞(PSCs)这一新近认识的CP纤维化重要病理机制，提出"和解利湿法对酒精性CP纤维化具有防治作用，其效应可能通过抑制TGF-β-Smad-ERK通路激活PSCs实现"的假说。拟运用酒精性CP大鼠模型和原代培养PSC模型，论证和解利湿法对该通路的影响，观察其主要作用环节，并揭示其主要效应方药及其配伍交互作用。为和解利湿方防治酒精性CP提供科学实验依据。

慢性胰腺炎（CP）是一种慢性难治性消化系统疾病，酒精是CP的主要病因。本课题提出"和解利湿法对酒精性CP纤维化具有防治作用，其效应可能通过抑制TGFβ/Smad/ERK通路激活PSCs实现"的假说，运用酒精性CP（ACP）大鼠模型和原代培养胰腺星状细胞（PSC）模型，论证和解利湿法对该通路的影响。.　 首先，我们制备了Lieber-DeCarli酒精流质饮食联合尾静脉注射脂多糖诱导的大鼠ACP模型，观察了和解利湿方对ACP的影响。结果表明，和解利湿方对ACP胰腺纤维化模型具有一定的治疗作用，能够抗炎，增加胰腺组织MMP-2、减少TIMP-1和TIMP-2表达，减少胶原沉积和α-SMA、FN含量、降低TGF-β1、Smad2, 3和ERK1的表达水平，抑制Smad2, 3和ERK1。而且，我们制备了高脂饮食联合灌胃酒精及尾静脉注射脂多糖诱导的大鼠ACP模型，比较了和解利湿方、柴胡桂枝汤和茵陈蒿汤预防治疗ACP的效果。结果表明，和解利湿方对高脂饮食结合酒精及脂多糖诱导的ACP胰腺纤维化也有一定的预防治疗作用，能够抗炎，减少大鼠ACP纤维化病变、胰腺组织羟脯氨酸含量以及collagen I和III的表达，其作用优于柴胡桂枝汤、茵陈蒿汤以及甘草酸。进一步，我们采用中药复方药物血清干预乙醛诱导的原代培养PSCs损伤模型，研究发现和解利湿方药物血清通过调节TGF-β/Smad信号通路蛋白的表达水平，抑制了乙醛诱导的PSCs生长，其作用优于柴胡桂枝汤和茵陈蒿汤。结合体内实验结果提示和解利湿方减少ACP胰腺纤维化，其作用机制可能与抑制PSCs的生长有关，而柴胡桂枝汤和茵陈蒿汤合方后药物间的交互作用是其效应的主要缘由。.　 我们还探讨了和解利湿方通过抑制胰腺腺泡细胞凋亡对大鼠ACP的作用机制。研究发现，和解利湿方能够减少炎症细胞浸润与胰腺腺泡细胞脱落，抑制caspase-3, 9活性，增加bcl-2、降低bax表达，提示和解利湿方防治大鼠ACP的作用机制也可能与减少腺泡细胞凋亡，调节胰腺细胞caspase-3，caspase-9的活性及bcl-2和bax蛋白的表达有关。.　 我们的研究阐明了和解利湿方抑制大鼠ACP纤维化的效应及柴胡桂枝汤和茵陈蒿汤配伍交互作用及其机制，为和解利湿方防治酒精性CP提供了实验依据。