EBV编码miR-BART22靶向LMP2A改善鼻咽癌干细胞放射抵抗

Nasopharygeal carcinoma cancer stem cells (NPC CSCs) is one of the key reasons for radiation resistance. Epstein-Barr virus-encoded microRNA miR-BART22 can inhibit LMP2A expression, which can induce radiation resistance mediated by NPC CSCs. Presently, through construction of high miR-BART22 expression cells C666-1, we found that high-level expression of miR-BART22 can increase radiosensitivity. Therefore, we assume that miR-BART22 may inhance radiosensitivity by decreasing production of NPC CSCs via inhiting LMP2A expression. In order to testify the above theories, we plan to measure miR-BART22 levels in clinical blood samples for correlation analysis. Meanwhile, we plan to isolate and culture NPC CSCs, construct miR-BART22 infected NPC CSCs, and observe its biological behaviour, characteristics of stem cells, radiosensitivity as well as tumor size changes. Thereafter, we aim to culture NPC CSCs infetcted with different levels of LMP2A so as to investigate whether it can reverse the biological effect of miR-BART22 and the down-stream signal molecular cells, in order to reveal the effect and mechanism of miR-BART22 in NPC CSCs radiation resistance.

鼻咽癌干细胞(NPC CSCs)是NPC放射抵抗根本原因之一，EBV编码miR-BART22可靶向抑制LMP2A表达，后者诱导NPC CSCs形成导致放射抵抗。近期我们构建miR-BART22不同水平C666-1细胞，发现高表达miR-BART22可改善放射抵抗。因此我们推测mi-BART22可能通过调控LMP2A抑制NPC CSCs生成，提高NPC放射敏感性。为验证这一假说，我们拟分离培养NPC CSCs，构建miR-BART22不同水平NPC细胞株与NPC CSCs，观察其生物学行为、干性、体内外放射敏感性以及相关信号通路的变化。并针进一步上下调节LMP2A在NPC细胞株与NPC CSCs中表达，观察是否逆转miR-BART22各种生物学效应，以期明确miR-BART2在NPC CSC放射抵抗中的作用及机制。本项目有望进一步阐释NPC放射抵抗机制，为NPC提供新的治疗靶点。

以放疗为主的综合治疗是鼻咽癌治疗的主要手段，鼻咽癌患者的预后虽有了较大改善，但部分患者仍存在局部复发和远处转移。如何增加鼻咽癌细胞的放射敏感性，以及如何降低鼻咽癌细胞的侵袭转移能力是鼻咽癌治疗领域的研究热点。本课题组拟探索调控鼻咽癌放射抵抗以及转移的分子机制，给临床治疗提供新的思路。鼻咽癌干细胞在放射治疗抵抗及肿瘤复发中可能具有重要作用。本课题组采用三维纤维蛋白软胶培养鼻咽癌细胞，从生长、迁移、耐药以及裸鼠成瘤能力多方面证实该细胞群体具有肿瘤干细胞特性，进一步，我们发现，mir205-5p通过调控维生素B1转运蛋白SLC19A2的表达参与调控鼻咽癌干细胞的放射敏感性。另一方面，鼻咽癌的发生与EB病毒感染密切相关。近期研究发现EB病毒编码的miRNA在肿瘤的发生发展中扮演着重要角色。本课题组从细胞实验水平证实EBV-miR-BART20-3p可能通过下调GDF6、MAP3K8、ITCH的表达参与鼻咽癌放射敏感性的调控， miR-BART13-3p通过调节SLUG的表达在鼻咽癌侵袭转移中发挥重要作用。本课题组研究发现参与调控鼻咽癌放射敏感性以及侵袭转移的3个miRNA，为未来开发鼻咽癌的治疗策略提供新思路。