复方土茯苓颗粒干预microRNA对高尿酸血症的影响

我们已对军队非标准制剂复方土茯苓颗粒（原泄浊除痹方）进行临床及动物实验，证实其能明显降低血尿酸浓度，并可影响尿酸盐阴离子交换器1（URAT1）促进尿酸排泄，可影响相关炎症因子（IL-1等）减轻机体损害。那么，复方土茯苓颗粒的降尿酸及机体保护机理是否在基因水平有所体现呢？我们对中药治疗后的microRNA表达谱系进行筛选，发现miR-34a、miR-146等32种microRNA的表达水平在该方治疗后发生明显改变，并与尿酸转运、炎症反应有密切关系。由此我们推测，复方土茯苓颗粒可能通过影响microRNA达到治疗及保护目的。本项目拟采用酵母法联合尿酸酶抑制法及腺嘌呤联合乙胺丁醇法诱导高尿酸血症动物模型，运用PCR等技术，进一步深入探讨microRNA与尿酸转运蛋白、炎症因子的关系，填补microRNA分子研究领域中关于高尿酸血症方面的空白，并为复方土茯苓颗粒治疗高尿酸血症作用机制提供实验依据。

高尿酸血症是一种由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄减少所引起的细胞外液尿酸盐超饱和状态。近年来高尿酸血症发病率显著增高，呈年轻化趋势，是一种严重危害人类健康的疾病。中药复方土茯苓颗粒是一首安全有效的治疗高尿酸血症的方剂，本项目主要对该方的作用机理进行探讨。本项目应用酵母膏联合氧嗪酸钾法及腺嘌呤联合乙胺丁醇法诱导高尿酸血症动物模型，检测动物血尿酸、血肌酐、血尿素氮、尿尿酸、URAT1、GLUT9、IL-1β、IL-6、TNF-α水平，筛选与高尿酸血症相关的microRNA并对其靶基因进行在线预测，对URAT1与miR-34a、IL-1β与miR-146a的关系进行验证。实验结果表明，对于不同动物模型，复方土茯苓颗粒治疗均可有效降低其血尿酸水平，不同剂量组之间呈现量效关系。降尿酸作用机理可能是通过上调miR-34a基因，以抑制URAT1基因的表达，从而抑制尿酸重吸收过程，促进尿酸排泄，降低血尿酸浓度。而复方土茯苓颗粒存在另一作用靶点GLUT9，通过抑制GLUT9基因的表达，促进尿酸排泄，在两者的共同作用下，使用复方土茯苓颗粒的降尿酸效应接近于公认的促进尿酸排泄药物苯溴马隆，有效治疗高尿酸血症。另外，复方土茯苓颗粒可降低IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子水平，具有良好的抗炎作用，通过抗炎起保护肾脏的作用，或可用于预防痛风及痛风性肾病。本项目证明了复方土茯苓颗粒的降尿酸及肾脏保护作用，同时为复方土茯苓颗粒通过影响microRNA达到治疗目的提供实验依据，阐明复方土茯苓颗粒治疗高尿酸血症的部分作用机制，填补microRNA分子研究领域中关于高尿酸血症方面的空白，为建立基因疗法提供理论依据。中药有效成分多样，作用机理较为复杂，并不能通过单一的作用靶点和途径证明其疗效及机制，更深入的机理探讨有待于进一步研究。