斑节对虾卵巢发育相关基因的克隆和表达研究

斑节对虾（Penaeus monodon）是我国和东南亚地区重要的海水养殖种类之一，在其苗种培育过程中，雌虾催熟一直采用眼柄切除法，但这种方法不利于重复使用，且有时会引起很高的死亡率。为寻求更为有效的人工可控的催熟新方法，本研究拟采用抑制性差减杂交（SSH）和同源克隆技术，筛选和克隆与斑节对虾卵巢发育相关的功能基因；研究卵巢发育相关基因的组织特异性表达和时序表达，探讨其表达过程及其调控机制，揭示卵巢发育相关基因在斑节对虾卵巢发育和繁殖过程中的作用机理；在得到全长基因后，选取1-2种重要的卵巢发育相关基因构建原核或真核细胞表达载体，优化体外表达条件和各种参数，纯化回收表达产物，制作相应重组蛋白的多克隆或单克隆抗体，研究其对卵巢发育的激活或抑制效应，探讨其在斑节对虾雌虾催熟技术中的适用性，为建立人工可控的斑节对虾催熟新技术提供理论依据。