阻断mTOR通路诱导Foxp3表达在银屑病发病中的作用机制

mTOR是涉及细胞增殖、肿瘤、炎症、和纤维化的重要信号通路，而叉头状转录因子3（FOXP3）主要通过影响CD4+CD25+ T细胞数量及功能而表现为免疫抑制功能，最终导致机体免疫失衡。我们前期发现：通过免疫组织化学、RT-PCR不同角度证实mTOR及Foxp3在银屑病皮损和外周血T细胞中表达增高，且与角质形成细胞的增殖和凋亡相关。然而，mTOR 及FOXP3在调控银屑病角质形成细胞增殖和局部炎症微环境发挥的相互作用及其机制尚不清楚。因此本项目拟通过基因转染和小分子RNA干扰技术，诱导或阻断角质形成细胞mTOR的表达，比较其角质形成细胞增殖凋亡情况及探索其与Treg 细胞的Foxp3的相互作用机制；本课题首次提出mTOR对角质形成细胞生物学行为的影响及其诱导Foxp3信号通路活化后对银屑病局部免疫的作用探讨。

mTOR是涉及细胞增殖、肿瘤、炎症、和纤维化的重要信号通路，而叉头状转录因子3（FOXP3）主要通过影响CD4+CD25+ T细胞数量及功能而表现为免疫抑制功能，最终导致机体免疫失衡。通过免疫组织化学、RT-PCR不同角度证实mTOR及Foxp3在银屑病皮损和外周血T细胞中表达增高，且与角质形成细胞的增殖和凋亡相关。银屑病患者组织中mTOR,Akt,PS6的表达比正常组织显著增加；Foxp3蛋白定位于细胞浆，也可在胞核中表达，阳性细胞弥漫分布。银屑病患者组织中Foxp3蛋白表达的炎症细胞阳性率为89.2％（32/36），明显高于银屑病患者非皮损区的25％（9/36），两者差异有显著性差异（P＜0.01）；空白对照（不用药）组、雷帕霉素组、mTOR-siRNA组分别经真皮注入银屑病SCID鼠移植物内。干预前后对皮损进行检测,小鼠脾脏中Foxp3mRNA的表达与p-mTOR蛋白表达呈负相关。小结:本课题立足于信号转导通路，初步探讨了FOXP3和mTOR信号转导通路的密切关系，得出结论如下：1．通过实验，我们确定了FOXP3与mTOR信号转导通路在抑制细胞凋亡，促进细胞生存方面关系密切；2．通过基因转染和小分子RNA干扰技术，诱导或阻断角质形成细胞mTOR的表达，比较其角质形成细胞增殖凋亡情况及其与Treg 细胞的Foxp3的相互作用机制。从蛋白水平，mRNA水平找出了两者有密切关系，并且通过质粒转染FOXP3，得出mTOR的表达下降，转染mTOR质粒，而FOXP3表达下降，从正反两个角度进一步确定了FOXP3和mTOR呈负相关的密切关系；为进一步深入研究mTOR信号转导通路提供了有力的帮助。