扶正剔邪搜络方对肺纤维化不同时相肺血管新生的调控及机制研究

Hypoxemia runs through the whole course of Idiopathic Pulmonary Fibrosis (IPF).Hypoxemia not only the main pathological change in formation process of IPF,but also the key factor of pulmonary angiogenesis and aggravation of pulmonary fibrosis.There is no effective drugs for IPF, Long-term oxygen therapy is one of strongly agreed treatments in the latest guidelines. Anomalous pulmonary angiogenesis can not play the role of gas exchange,which impact the pulmanaru diffuse and effect of oxygen therapy. Our preliminary work has been observed that fuzhengtixiesouluo formula can delay the development process of fibrosis,then the hypothesis of that fuzhengtixiesouluo formula can remove the effect of oxygen by intervent the pulmonary angiogenesis is offered.Based on this,via the method of combining the in vivo and in vitro experiments,we propose to verify the efficacy of fuzhengtixiesouluo formula to rats with IPF,and observe the regulation of fuzhengtixiesouluo formula to pulmonary angiogenesis,and further reseach on the mechanism of strengthen the effect of oxygen therapy, to provide the theory evidence for clinic.

低氧贯穿特发性肺纤维化（IPF）整个病程，既是IPF形成过程中主要病理改变，又是诱导肺血管新生、加重肺纤维化发展的关键因素。最新指南明确提出IPF尚无有效药物，长期氧疗是强赞同的治疗方法之一，而异常肺新生血管因其结构不成熟往往不能发挥正常气体交换作用，影响肺弥散功能及氧疗效果。本课题组前期研究已观察到扶正剔邪搜络方可延缓大鼠肺纤维化发展进程，因此提出"扶正剔邪搜络方可通过干预肺新生血管提高氧疗效果"的假说，在此基础上拟通过体内实验与体外实验相结合的方法，进一步验证扶正剔邪搜络方干预肺纤维化大鼠的疗效，并通过观察扶正剔邪搜络方对肺纤维化不同时相肺血管新生的调控作用，完善扶正剔邪搜络方改善肺弥散功能、增强氧疗效果的的作用机理，为临床上应用扶正剔邪搜络方干预肺纤维化提供理论依据。

特发性肺纤维化是呼吸系统疑难病之一，其致死率较高。关于其病理机制，血管新生成为新的热点。本研究通过成功复制博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠模型，验证了扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠的疗效。稳定的动物模型是实验能够顺利进行的基础，同时，该动物实验从不同方面验证了扶正剔邪搜络方的疗效，与我课题组前期临床研究结果相符合，表明以补益气阴之药扶正、以虫类药物搜络剔邪的基本治法在IPF的治疗中确为一种重要且疗效稳定的方法，可以扩大临床应用。通过对大鼠一般情况的观察，结合全面详细的大鼠证候观察方法，以及大鼠肺功能检测和血液流变学检测，初步明确博莱霉素致肺纤维化大鼠的症状和体征与临床“气虚血瘀证”的表现最为贴近。这是对博莱霉素所致肺纤维化大鼠证候特征的初步探索，其结果表明本实验研究的立法处方符合中医辨证论治的基本特点。同时，该探索也是对动物模型证候研究的推进，从宏观体征信息观察和微观理化指标检测方面，为动物模型与临床证候特征的对应及转换研究提供了翔实可靠的参考资料。对于扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠氧疗效果的影响及机制进行了初步探索，初步明确扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠肺血管生成的调控作用及其机制，通过对肺组织微血管密度的检测以及肺血管生成相关因子的检测，发现扶正剔邪搜络方能够通过降低VEGF的水平，抑制肺组织的异常血管新生，从而发挥对肺纤维化的治疗作用。通过RT-PCR和western-blot检测肺微血管内皮细胞Notch1通路相关蛋白水平，发现扶正剔邪搜络方能够通过干预Notch通路抑制肺血管新生延缓肺纤维化进程；通过对肺血管生成相关因子的表达，发现扶正剔邪搜络方能够通过降低VEGF的水平，抑制肺组织的异常血管新生，从而发挥对肺纤维化的治疗作用，与体内实验结果相吻合，进一步验证了扶正剔邪搜络方抑制血管新生的作用。