LOX-1介导凋亡细胞清除的分子机制和生物学功能研究

树突细胞表面的LOX-1能够清除凋亡细胞、衰老红细胞等，然而这些细胞颗粒表面LOX-1所识别的配体分子还有待进一步被鉴定。热休克蛋白在细胞内发挥分子伴侣的功能。在细胞凋亡等过程中，热休克蛋白能够易位到细胞膜表面，目前对易位到凋亡细胞表面的热休克蛋白的功能还知之甚少。我们前期研究表明LOX-1作为HSP60家族的共同受体，并且LOX-1能够内化HSP60包被的胶珠，同时也观察到LOX-1能识别HSP90。本课题拟通过细胞流式分析等方法证实LOX-1作为HSP60、HSP70和HSP90的共同受体，阐明LOX-1通过识别凋亡细胞表面HSP60、HSP70 和HSP90介导凋亡细胞清除的分子机制；用模式抗原OVA模拟异己抗原，阐明LOX-1清除凋亡细胞过程中对抗原的提呈功能；研究干扰素对LOX-1的表达调节，探讨干扰素在抗病毒和抗肿瘤治疗中的可能机制，为以LOX-1作为靶向的免疫治疗奠定基础。

氧化低密度脂蛋白受体1 (L0X-1)是清道夫受体家族成员之一，主要表达于血管内皮细胞，平滑肌细胞以及树突细胞等表面。L0X-1能够介导树突细胞识别HSP70，并且参与抗原的交叉提呈。氧热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)又称应激蛋白(stress proteins)，是机体细胞在一些应激原如环境高温、缺氧、氧化应激、代谢毒物等条件诱导下，激活HSPs基因,高效表达的一组蛋白质。HSPs在体内可与多种蛋白质形成复合体，陪伴蛋白分子在细胞内转运、跨膜，参与蛋白质的折叠与伸展、多聚复合体的组装，发挥其调节靶蛋白的作用，故热休克蛋白又被称作“分子伴侣”。在凋亡以及不同应激的刺激下，多种HSPs从胞内易位至细胞膜或者释放到胞外。在本研究中，我们发现多种哺乳动物细胞在UV照射或顺铂导致的凋亡发生早期，细胞内的HSP60、HSP70和HSP90会迅速易位表达至细胞膜，这个过程发生在磷脂酰丝氨酸(PtdSer)外翻之前。进一步实验证实，凋亡细胞表面的HSP60、HSP70和HSP90促进小鼠骨髓来源的树突细胞(BMDC)释放IL-1β和IL-6等促炎因子，并促进BMDC成熟。此外，我们还发现包被HSP60、HSP70和HSP90的乳胶微珠能够与BMDC表面的LOX-1相互作用，从而促进凋亡细胞清除以及凋亡细胞抗原提呈。