基于结构方程模型的民族药灯盏细辛防治缺血性中风的PK-PD相关性研究

民族药灯盏细辛在临床上用于"左瘫右痪"、"胸痹"等重大疑难疾病的防治，疗效确切。本课题组在完成四个相关国家自然科学基金项目后，初步明确了灯盏细辛防治缺血性中风的物质基础，同时基于代谢组学方法也揭示了能表征其有效性的生物标志物群，但二者的相关性不明确。故提出"结构方程模型有助于解析灯盏细辛防治缺血性中风的多成分药动(PK)-多指标药效(PD)相关性"的假说。本课题充分考虑到民族药多组分、多靶点的作用特点，以灯盏细辛为研究对象，使用自发性高血压大鼠复制脑缺血再灌注损伤模型，应用UPLC/TOF-MS、NMR等分析手段，动态监测灯盏细辛调控的药效指标- - 生物标志物群的变化(PD)和有效成分群的药动学特征(PK)，基于结构方程解析"量-时-效"三维关系并构建PK-PD模型，以期揭示灯盏细辛多个有效成分和多个生物标志物间的复杂对应关系，从而为进一步研究民族药药效物质基础发挥药理效应的作用机制提供参考

以灯盏细辛注射液为研究对象，制造大鼠脑缺血再灌注损伤模型(MCAO)，开展PK、PD及其相关性研究。.定性灯盏细辛注射液中10个成分，即灯盏乙素、灯盏甲素、4-咖啡酸酰奎宁酸、5-咖啡酸酰奎宁酸、1,3-二咖啡酸酰奎宁酸、3,5-二咖啡酸酰奎宁酸、4,5-二咖啡酸酰奎宁酸、咖啡酸、绿原酸、异绿原酸B，并定量9个。定性入血成分10个、入血未定性成分5个（其中3个为体内代谢产物）。.灯盏细辛治疗MCAO的PD：大鼠脑梗死率随时间的延长呈现增加的趋势，在5min时效应最大即脑梗死率最小（0.0154），AUClast为0.4653 h-1。.灯盏细辛治疗MCAO的PK：7个成分在大鼠血浆中的浓度-时间曲线总体呈现降低趋势，均经历3-4次降低的过程，多出现在脑缺血第20min、30min和2h时。灯盏乙素的Tmax为0.1667h，Cmax为60.2523μg/mL，AUCtot为26.0896 μg/mL/h，T1/2为1.0427 h，MRT为1.2940 h。4-咖啡酸酰奎宁酸、5-咖啡酸酰奎宁酸、3,5-二咖啡酸酰奎宁酸、4,5-二咖啡酸酰奎宁酸、绿原酸和异绿原酸B的PK参数详见正文。.灯盏细辛治疗MCAO的PK-PD相关性：7个成分与脑梗死率间均呈负相关，且以时间为序均可画得顺时针滞后回线，拟合回归方程为y=0.078+0.001x1-0.041x2（y为脑梗死率，x1为灯盏乙素血药浓度，x2为绿原酸血药浓度）。灯盏乙素的Cmax为45.4745 μg/mL，AUCtot为1.8454 mL/μg，EC50为22.6788 μg/mL，MRC为35.6551 μg/mL。其余六个成分的PK-PD参数详见正文。.灯盏细辛注射液注射后7个成分的血药浓度在脑缺血5-10min达峰，3-6h后为零或很低，药效的Tmax虽为第5min，但维持时间超过6h，即出现了“药理效应滞后于血药浓度的现象”，可能与药物逐渐分布进入脑组织有关，有待深入研究。.总之，不仅同时开展了灯盏细辛注射液中7个成分的PK，而且还揭示了它们与脑梗死率之间的“量-时-效”关系，为灯盏细辛的作用机制和物质基础研究提供了参考。通过本课题的实施，发表论文4篇，授权实用新型专利1项，培养硕士研究生和博士后各1名，课题负责人被评为“第四批四川省中医药管理局学术和技术带头人后备人选”。