效应性T细胞失衡在心房颤动慢性化中的作用及其机制

近年研究发现效应性T细胞1（Th1）/效应性T细胞2（Th2）比例失衡与多种心血管疾病相关。Th细胞在炎症反应的调节中起重要作用，而炎症反应可加重心房纤维化，我们前期研究发现心房纤维化是促进房颤慢性化的重要原因之一。但目前研究还不能证实Th1/Th2失衡与房颤慢性化之间的关系。故本课题拟通过持续快速心房起搏诱导犬心房颤动，同时进行上调或下调Th1/Th2细胞比值的干预，观察外周血Th1/Th2细胞比值的变化，以验证"Th1/Th2失衡促进房颤慢性化"的假说。并进行Th1及Th2细胞主要效应因子水平检测，心脏超声、电生理学及组织学检查，分离培养外周血T细胞，干预Th1/Th2细胞比值，提取上清液刺激离体培养的心房成纤维细胞，检测其分泌的胶原蛋白量，探讨其中作用机制。通过验证假说为更特异的针对慢性房颤维持机制的治疗提供依据，为下一步调整Th1/Th2平衡阻止房颤慢性化提供重要的理论和实验依据。

心房颤动慢性化的机制仍不完全明确，我们的前期研究发现心房纤维化是促进房颤慢性化的重要原因之一。近期研究显示多种炎症因子与房颤的发生、发展与再发有密切关系。效应性T细胞在多种炎症反应中起重要调节作用，效应性T细胞的主要亚群Th1/Th2失衡与多种心血管疾病相关，其分泌的多种炎症因子可影响房颤的进展。故本课题通过快速心房起搏诱导犬心房颤动，应用IL-12或拉喹莫德调整Th1/Th2平衡，观察Th1及Th2效应因子IFN-γ、IL-4及CRP水平变化，了解效应性T细胞失衡与心房颤动的关系，并探讨效应性T细胞失衡导致房颤慢性化的机制。本研究将21只犬植入起搏器，以心房快速起搏8周诱导房颤，随机分为3组，对照组于起搏后分次静脉注射生理盐水；炎症因子组静脉注射IL-12；药物干预组静脉注射生理盐水并口服拉喹莫德0.5mg/d。快速心房起搏4周时，各组犬Th1/Th2比值、血浆IFN-γ、IL-4、CRP及心房内径与起搏前相比有升高趋势，但差异无统计学意义；8周时炎症因子组Th1/Th2比值明显升高（炎症因子组2.06±0.09, 对照组1.58±0.09, 药物干预组1.59±0.10, p＜0.05），左右心房内径较起搏前、对照组及药物干预组明显增大，血浆及心房组织中IFN-γ、CRP升高， IL-4降低，差异有统计学差异，而对照组与药物干预组起搏前后心房内径、炎症因子及Th1/Th2比值均无明显差异。相对于对照组，炎症因子组停止起搏后维持房颤律犬的比例较高，房颤持续时间相对延长；而对照组与药物干预组维持房颤律犬的比例及房颤时间无明显差异。炎症因子组天狼星红染色左右心房胶原体积分数明显高于对照组及药物干预组，对照组和药物干预组之间无明显差异。左右心房胶原体积分数与Th1/Th2比值均呈正相关。因此静脉注射IL-12可使房颤犬Th1/Th2比值升高，IFN-γ及CRP升高， IL-4降低，房颤持续时间延长，心房增大，心房胶原体积分数增高，而口服拉喹莫德8w未见显著Th1/Th2比值下调及心房纤维化逆转。本研究成功建立房颤模型，通过静脉注射IL-12干预Th1/Th2比值及炎症因子水平，验证了“Th1/Th2失衡促进房颤慢性化”的假说，提示了效应性T细胞在房颤慢性化中的重要作用。为有效防治房颤提供新的靶点和线索，为下一步研究恢复Th1/Th2平衡阻止房颤慢性化提供理论和实验依据。