Notch信号抑制剂逆转多发性骨髓瘤化疗耐药及其分子机制研究

Notch信号的异常活化与多种肿瘤的发生、发展密切相关，最近的研究证实Notch信号的异常活化与肿瘤细胞耐药的形成有关。我们前期工作发现骨髓瘤细胞中存在Notch信号异常活化，Notch信号抑制剂通过抑制NOTCH信号表达抑制细胞增殖，诱导瘤细胞凋亡，提示Notch抑制剂是潜在的抗骨髓瘤药物。PHI是天然的植物抗肿瘤制剂，体内外研究证实PHI抑制骨髓瘤细胞增殖，逆转白血病的化疗耐药，是Notch信号的抑制剂。本研究目的是证实Notch途径活化参与骨髓瘤化疗耐药，通过抑制Notch信号异常可能逆转对化疗药物耐受，分析其分子机制，以发现骨髓瘤治疗的新的靶点，为骨髓瘤治疗开辟新途径。

多发性骨髓瘤是最常见的血液系统恶性肿瘤之一，目前联合化疗仍然是目前主要的治疗模式，肿瘤细胞的化疗耐药是影响骨髓瘤疗效的主要障碍。化疗介导的骨髓瘤细胞耐药形成机制十分复杂，涉及多种基因异常和信号传导的异常，有研究发现，Notch信号异常可能与肿瘤细胞的化疗耐药形成有关，为了明确骨髓瘤细胞耐药机制与Notch信号异常关系，寻求新的逆转骨髓瘤化疗耐药的途径，我们进行本研究。.本研究采用了细胞培养，ELISA，流式细胞技术，半定量PCR，蛋白免疫沉淀技术，基因沉默技术等，建立了小鼠骨髓瘤模型，进行了小鼠模型的体内实验，得到了以下初步结论⑴明确了Notch信号系统Jag-1，JAG-2和Notch1配体过度表达是导致细胞过度增殖，形成耐药的原因之一。⑵Notch信号抑制剂体外对骨髓瘤细胞有显著增殖抑制效应，对耐药细胞具有同等效应。⑶在骨髓瘤小鼠模型中证实GSI处理可以显著减轻瘤细胞致瘤性⑷Notch信号抑制剂对骨髓瘤细胞作用机制与下调减低Notch信号的表达水平，活化抑癌基因PETN，P16基因的去甲基化复活，细胞因子的分泌调节有关。⑸PHI和AS2O3具有克服骨髓瘤耐药能力，作用机制与调节notch信号有关。⑹骨髓瘤化疗耐药机制形成与Hh信号的表达失常和DNMT活性改变有关，采取多途径联合作用有利于逆转骨髓瘤耐药。.本研究的的结果明确了Notch信号，Hh信号在骨髓瘤化疗耐药机制中的地位，本研究结论对于骨髓瘤耐药机制提供了新的解释，本研究的意义在于根据作用机制的不同，设计可能的新的逆转化疗耐药的药物或寻找天然药物，以Notch信号，Hh 信号为靶点进行药物设计可能成为克服骨髓瘤化疗耐药的新途径