鸡传染性法氏囊病病毒细胞嗜性及致病性变异的分子基础

鸡传染性法氏囊病（IBD）是主要危害雏鸡的急性、致死性、免疫抑制性传染病。鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）易变异，超强毒株（vvIBDV）的广泛流行更给养禽业造成了巨大损失。目前，防控该病的传统疫苗株仍然源自病毒传代致弱（费时费力），而且vvIBDV致弱的具体分子机制尚未阐明。申请人前期研究发现，衣壳蛋白VP2与vvIBDV致弱关系密切。为进一步精确定位其主要分子基础，本项目拟以vvIBDV Gx株、疫苗株Gt（由Gx致弱）为材料，以VP2蛋白P区顶端的五个关键氨基酸位点为研究对象，利用自主研发的成熟的反向遗传操作系统，通过基因修饰和病毒拯救，以CEF细胞和SPF鸡为研究载体，以病毒细胞嗜性和致病性为研究内容，阐明vvIBDV致病性降低、适应CEF细胞培养并能大量增殖的分子基础。本研究不仅有助于深入了解IBDV遗传变异规律，更为利用反向遗传技术快速构建IBDV疫苗候选毒株奠定基础。

传染性法氏囊病（IBD）是危害鸡的重要免疫抑制性传染病。传染性法氏囊病病毒（IBDV）易变异，超强毒株（vvIBDV）的广泛流行更给养禽业造成了巨大损失。目前，防控该病的传统疫苗株仍然源自病毒传代致弱（费时费力），而且IBDV野毒株致弱的具体分子机制尚不明确。本研究首次从自然毒株和反向遗传操作两个角度，通过系统的正反两方面翔实的试验数据，证明了VP2的253/284协同突变是决定IBDV细胞嗜性的关键分子基础。证明了VP2的253/284协同突变是影响IBDV致病性的关键分子基础，另外249、256位氨基酸也是重要的毒力位点，其突变可协同253/284将vvIBDV进一步致弱。在VP2上发现了一系列新的影响IBDV复制效率的氨基酸位点，分别为222、249、256位氨基酸。证明VP1 4位氨基酸突变可通过影响RNA聚合酶活性而影响病毒的致病性和复制效率。另外，建立了IBDV超强毒的反向遗传操作平台，解决了深入开展IBDV基因功能研究的又一个瓶颈。在上述理论基础和技术平台基础上，针对目前疫病的最新流行情况，发明了IBDV疫苗新型创制方法并研制了新型疫苗。本研究证明和鉴定了影响IBDV细胞嗜性、复制和毒力的重要分子基础，并发明了新的技术平台，创制了新产品，对深入阐明IBDV的遗传变异机制以及综合防控意义重大。本研究已发表文章7篇，SCI收录2篇；培养硕博士研究生2名；研制新型疫苗候选株1个；获发明专利1项；获大北农科技特等奖1项。本研究相关成果被编入《未来10年中国科学发展战略-农业科学》（国家自然基金委和中科院编，科学出版社，2012：222-223）。