BRD4抑制剂JQ1与PD-1抗体联合应用治疗高危型子宫内膜癌的机制研究

Patients with high-risk endometrial cancer(HREC) are at increased risk of recurrence and metastasis. Adjuvant therapies are limited to those with HREC, which ends up with a poor prognosis. Previous study showed that BRD4 was highly expressed in HREC tissue, and high-BRD4 expression indicated a poor pronosis. JQ1, a specific inhibitor for BRD4, displayed a certain effect on various endometrial caner cell lines and xenograft models. However, we discovered that JQ1 induced expression of PD-L1 and promoted epithelial-mesenchymal transition. We hypothesized that combination JQ1 with PD-1 antibody may present superiority over monotherapy for HERC. In present study, we plan to explore the mechanism of upregulation of PD-L1 by JQ1. By using immunity-reconstructed patient-derived xenografts (PDXs), we weill study the therapeutic effect and elucidate the mechanism of combination of JQ1 and PD-1 antibody. Our study will provide a theory basis for clinical application of JQ1 and PD antibody in HREC; moreover, combining HREC molecular and pathological classifications, our result will provide new thoughts for individualized treatment of HREC.

高危型子宫内膜癌（HREC）具有易复发、高转移特性，临床疗效差、患者生存率低，因而探寻新的治疗方法具有重要意义。前期发现表观遗传调控因子BRD4在HREC组织中高表达，与病人预后呈负相关；其特异性抑制剂JQ1能够抑制HREC细胞及裸鼠移植瘤的生长，但会促进PD-L1表达上调，易导致肿瘤细胞免疫逃逸，JQ1与PD-1抗体联合应用治疗HREC效果还不明确。在此基础上，本课题拟探讨JQ1上调PD-L1表达的分子机制；利用临床不同分子分型和病理分型的HREC组织构建免疫重建的PDX小鼠模型，观察JQ1与PD-1抗体单独或联合应用对不同分型HREC的疗效；通过检测外周血和肿瘤组织中T细胞及相关细胞因子的水平，阐明JQ1联合PD-1抗体协同激活免疫系统发挥抗肿瘤的机制。本课题为临床应用BRD4抑制剂与PD-1抗体联合治疗HREC提供了理论依据，并建立以HREC分型为标准来指导内膜癌患者个体化免疫治疗。

随着人口老龄化和肥胖发病率的升高，子宫内膜癌（EC）已成为发达国家最常见的女性生殖系统肿瘤。手术±辅助治疗是EC主要治疗手段，但是对于晚期或者复发EC疗效有限，因此探寻新的EC治疗方法具有重要意义。近年来，免疫治疗、靶向治疗等新型治疗策略的开发，使肿瘤治疗多元化。本项目在已有工作基础上进行了以下研究：1）揭示联合应用BET抑制剂在子宫内膜癌中的抗肿瘤机制。表观遗传因子BRD4表达在EC中高于正常组织，与患者预后呈负相关。BET抑制剂可引起EC细胞凋亡和周期阻滞，抑制EC细胞增殖和裸鼠移植瘤生长，机制与调控mTOR/AKT通路和c-Myc有关。2）BET抑制剂和PD-1/PD-L1抑制剂联合应用对高危型EC抑制作用的机制研究以及BET抑制剂激活抗肿瘤免疫应答发挥抗肿瘤效果新机制。JQ1能够抑制CD274及CD276的表达，CHIP-seq表明以上两个基因启动子区有BRD4结合位点。JQ1能有效引起EC细胞的钙网蛋白（CRT）迁移至细胞膜，促进ATP释放，引起免疫原性细胞死亡。3）构建Aptamer修饰的JQ1纳米递药系统以解决JQ1体内应用的局限性。本课题组成功构建了负载JQ1的脂质体纳米递药系统；为增加靶向性，我们拟在其表面连接上靶向肿瘤细胞高表达的核仁素蛋白NCL的适配体AS1411，旨在为EC靶向输送JQ1。4）BRD4抑制剂JQ1促进EC细胞对孕激素作用敏感性的机制研究。JQ1联合MPA对孕激素敏感的EC细胞有较好的增殖抑制及凋亡作用，其可能机制与抑制mTOR/AKT通路有关。5）新型EC分子标志物的研究。EC分子分型取得重要的进展，但仍有许多分子表型的差异尚不明确。因此，寻找新的分子标记物对预测EC的预后和确定潜在的治疗靶点具有重要意义。①KIF20A表达水平较癌旁正常组织明显升高，与患者的不良预后有关，其表达和淋巴结转移是影响患者PFS的独立预后因素。②GA结合蛋白转录因子A(GABPA)在EC中低表达，与患者预后呈正相关，其表达水平可能与基因甲基化有关。本课题的实施为临床应用BET抑制剂与免疫药物、孕激素类药物联合治疗高危型子宫内膜癌提供转化医学证据，利用新的分子分型指导患者个体化治疗，具有较大的社会价值。