微泡声学造影剂联合单抗介导sels基因定向转染抗2型糖尿病性动脉粥样硬化研究

有效防治动脉粥样硬化（AS）是尚未解决的重要医学难题。本组曾采用微泡声学造影剂与超声照射方法（MCA-UE）增强与AS多重危险因素均密切相关的硒蛋白S（SelS）在内皮靶细胞中的表达，发现SelS-MCA-UE转染细胞较SelS普通脂质体转染细胞能更有效地抵抗过氧化氢及2型糖尿病（T2DM）患者血清对靶细胞诱导的氧化应激损伤。本课题试以此为基础，制备与血管细胞粘附分子-1单克隆抗体相连接的SelS基因微泡声学造影剂复合体（SMMV），以高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射法建立T2DM-AS大鼠模型，观察SMMV-UE对SelS基因在大鼠颈总动脉血管壁转染效率的影响，建立提高动脉血管壁靶向基因转染效率的有效方法，探讨靶向转染SelS保护内皮功能、防治AS的作用及机制，以期为AS特别是T2DM大血管并发症的防治建立新的策略和方法。

有效防治动脉粥样硬化（AS）是尚未解决的重要医学难题。本研究通过多级抗生物素蛋白-生物素桥接化学法成功制备了与血管细胞粘附分子-1单克隆抗体相连接的SelS基因微泡声学造影剂复合体（SMMV），为靶向转染奠定物质和技术基础。SMMV在UE的作用下可明显增强pcDNA3.1-SelS转染入大鼠胸主动脉的效率，为血管内皮细胞保护研究及基因治疗血管病变奠定了实验技术基础。以高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射法建立T2DM-AS大鼠模型，应用不同剂量的SelS基因高表达质粒（50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg）进行转染，分别于转染后第1、3、5、7天处死大鼠检测胸主动脉SelS表达丰度，发现胸主动脉SelS mRNA及蛋白表达量在转染剂量为100μg/kg的第5天达最高峰。本研究中 T2DM-AS大鼠血清C反应蛋白（CRP）、血清淀粉样蛋白A（SAA）及血浆内皮素-1（ ET-1）水平升高，经单次尾静脉注射SMMV行体内SelS基因转染后，可以明显降低大鼠血清SAA、CRP及血浆 ET-1的水平。提示SelS基因的转染可以发挥一定的内皮保护作用，这种作用可能与其下调炎症因子水平有关。转染质粒剂量100μg/kg，每5天尾静脉注射1次，共4次进行转染，研究超声微泡介导SelS基因体内转染对2型糖尿病大鼠动脉粥样硬化的治疗作用并深入探讨SelS发挥内皮保护作用的相关机制。该部分研究即将结束。