BTK引发多发性骨髓瘤耐药性研究

Multiple myeloma (MM), the second most common hematologic malignancy, is a genetically heterogeneous disease. Patients with MM typically respond to initial treatment, but a majority will ultimately relapse. To pursue a pervasive cure for MM, identifying and addressing the drug-resistant MM subclones as well as garnering a better understanding of the genetic makeup of these subclones is required. Using global gene expression profiling (GEP), our group discovered that BTK increased in MM cells compared to normal plasma cells control. Besides, MM patients with high BTK expression suffer poor survival relative to low-BTK-expressing patients. More importantly, we disclosed that BTK overexpressing MM cells were resistant to clinical chemotherapy drugs, Bortezomib and Doxorubicin et al. In this study, we will firstly verify the role of BTK and β-catenin in MM drug-resistance in vitro by using lentiviral overexpressing and knockdown, flow cytometry, RT-PCR and western blot et al. on MM drug-resistance cell lines and MM with extracellular co-culture system. Secondly, we will confirm the role of β-catenin in BTK-mediated MM drug-resistance in vivo through xenograft mouse model, in vivo confocal microscope and 5TGM1 MM mouse model. At last, we will explore the mechanism on how BTK activates β-catenin in MM through co-immunoprecipitation assay, in vitro phosphorylation assay and ubiquitin test et al. Our study will provide a novel target for the treatment of drug-resistant multiple myeloma and greatly improve patient outcome.

多发性骨髓瘤（MM）是第二大血液系统恶性肿瘤, 大部分MM病人病症在治疗初期获得完全缓解，但是随后出现耐药性，并复发而最终死于MM。因而，揭示MM耐药性分子机制是目前MM研究与治疗的重要目标。本人研究发现，BTK基因在MM 细胞中的表达明显高于其相对应的正常浆细胞， 高表达BTK的MM患者生存率明显低于低表达患者。更重要的是， 过表达BTK的MM细胞对临床化疗药物呈现明显的耐药性。在本课题中，我们将围绕BTK引发MM细胞耐药性这一问题， 首先采用慢病毒过表达和敲减技术，MM 细胞与细胞外基质共培养等手段在体外验证BTK以及β-catenin引发MM耐药性的作用；其次，拟运用免疫缺陷小鼠模型、活体显微镜以及5TGM1骨髓瘤小鼠模型确认BTK和β-catenin在体内介导MM耐药性的功能；最后，通过免疫共沉淀、体外磷酸化以及泛素化检测等技术研究MM细胞中BTK激活β-catenin的作用机理。

多发性骨髓瘤（MM）是第二大血液系统恶性肿瘤, 大部分MM病人病症在治疗初期获得完全缓解，但是随后出现耐药性，并复发而最终死于MM。因而，揭示MM耐药性分子机制是目前MM研究与治疗的重要目标。在本项目的资助下，本人先后发现：1. BTK引发多发性骨髓瘤吸附耐药作用及相关机制；2. BTK抵御多发性骨髓瘤耐细胞衰老作用研究；3.高危多发性骨髓瘤的治疗靶点MK2；4.多发性骨髓瘤的治疗靶点FOXM1。综上，BTK 、MK2、FOXM1等均具有多发性骨髓瘤治疗靶点的潜在可行性，靶向相关基因，对多发性骨髓瘤具有显著的治疗作用。本研究对多发性骨髓瘤临床诊断、治疗均具有重要指导作用，BTK 、MK2、FOXM1均具有成为临床诊断标志物的可行性，相关靶向抑制剂具有临床用药开发的前景。. 在本项目的资助下，项目主持人共发表学术论文22篇，其中通讯或第一作者SCI论文12篇，累计影响因子约63分，单篇最高影响因子分别为10.023、9.09、8.125分；通讯作者发表中文核心期刊4篇；申请专利6项，2项获得授权。另外，项目主要研究成果之一，” BTK induces CAM-DR through regulation of CXCR4 degradation in multiple myeloma”论文，已投稿血液学权威期刊，Leukemia, 目前正在审稿中，投稿号：18-LEU-1641。. 在本项目资助下本人还获得国家重点研发计划精准医学专项子课题、国家自然科学面上项目、江苏省特聘教授、江苏省杰出青年科学基金项目等近10项国家级、省部级项目，累计资助金额1000余万元。获第十五届江苏省青年科技奖获奖者暨2015-2016年度“江苏省十大青年科技之星”、第58届美国血液学年会摘要成就奖等荣誉。.