不同灸法治疗RA的抗炎效应及其HSP70分子调控机制研究

艾灸治疗类风湿性关节炎（RA）具有疗效肯定和无毒副作用的独特优势。在艾灸治疗RA的效应与机理研究取得重要进展的基础上，本研究把握艾灸的温热刺激特性，依据"艾灸抗炎效应明确，不同灸法具有不同的温热刺激模式，热休克蛋白70（HSP70）与热刺激和炎症控制均有密切关系"的基本事实，提出"不同灸法诱导RA模型HSP70的不同表达是其抗炎效应差异的重要生物学基础"的研究假说。以针灸理论为指导，分别直接灸、隔物灸、温和灸家兔"肾俞"、"足三里"治疗实验性RA，观察其抗炎效应差异；围绕滑膜炎症关键病理环节，选择HSP70作为研究切入点，以"艾灸温热刺激-HSP70表达与调控-抗炎效应"为研究主线，运用神经化学阻断、RNA 干扰、免疫组化、Western-blot、流式细胞检测等方法技术，探索不同灸法诱导RA模型HSP70表达及其抗炎机制，对于深化艾灸治疗RA的原理研究、丰富灸法的科学内涵具有重要的价值。

本课题以中医针灸理论为指导，以抗炎效应为目标、HSP70为研究切入点、以“不同灸法—HSP70表达与调控—抗炎效应”为研究主线，比较观察不同灸法（直接灸、隔姜灸、温和灸）对实验性RA模型的抗炎效应差异；运用神经化学阻断、RNA 干扰、免疫组化、Western-blot、流式细胞检测等方法技术，研究不同灸法对实验性RA模型HSP70表达、滑膜细胞分泌功能与增殖分化、滑膜细胞NF-κB信号通路的影响，探索不同灸法治疗RA的抗炎作用及其HSP70分子调控机制，深化艾灸治疗RA的原理研究，为临床运用灸法治疗RA提供更丰富的科学依据。研究结论：1、不同灸法均具有明确的抗炎效应，但以隔姜灸作用最为明显，而运用工具药槲皮素可以取消不同灸法之间的抗炎效应差异;2、不同灸法均可诱导RA模型动物滑膜组织和滑膜液HSP70大量表达，运用槲皮素可在一定程度上抑制HSP70表达，提示HSP70可能在不同灸法的抗炎效应中发挥重要作用; 3、虽然槲皮素可以取消隔姜灸与温和灸、直接灸的抗炎效应差异，但并不能完全取消这三种灸法的抗炎效应，提示隔姜灸突出的抗炎效应可能与HSP70关系更为密切，但灸法的抗炎效应并不完全依赖于HSP70机制来实现; 4、不同灸法均能明显抑制RA模型动物滑膜细胞分泌相关炎症细胞因子的功能，但以隔姜灸作用最为明显;5、不同灸法均能明显抑制RA模型动物滑膜细胞NF-κB信号通路相关分子表达，但以隔姜灸作用最为明显;6、艾灸治疗可改善病理性炎性滑膜成纤维细胞生长状态，并具有促进其向正常化转归的作用。