自噬在树突状细胞抵御马尔尼菲青霉感染中的作用机制研究

Autophagy plays a vital role in infectious diseases such as bacteria, virus, fungus, and parasite and so on. In previous study, we have demonstrated P. marneffei induced autophagy in dendritic cells. Here, the signaling pathways of autophagy induced by P.marneffei will be detected by RT-PCR, western blot and immunohistochemistry. Further, the pathways will be identified by RNAi, inhibitors and overexpression. Through this project, we will clarify initially role of autophagy in P.marneffei-infected dendritic cells. This project will be helpful for the work of treatment in penicilliosis marneffei.

自噬通过清除细胞内病原体，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等，在抗感染性疾病中发挥了重要的保护作用。前期工作证实马尔尼菲青霉诱导人源树突状细胞发生自噬。本课题采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测马尔尼菲青霉感染的树突状细胞中自噬发生所涉及的信号通路，并对活化通路使用RNAi、信号阻断剂和过表达验证；检测马尔尼菲青霉感染的细胞中的自噬性细胞死亡现象。通过上述实验进行马尔尼菲青霉感染树突状细胞自噬发生的分子机制研究，对深入地阐明树突状细胞抵御马尔尼菲青霉的机制有重要意义，为寻找以自噬为切入点进行马尔尼菲青霉感染治疗措施提供理论基础。

自噬在清除各种病原微生物过程中发挥了重要的保护作用。但是自噬是否参与了马尔尼菲青霉感染树突状细胞的免疫过程目前尚不清楚。因此，为了探讨自噬在树突状细胞抵御马尔尼菲青霉感染中的作用，本项目通过马尔尼菲青霉感染的树突状细胞中自噬发生所涉及的MAPK信号通路研究马尔尼菲青霉感染的细胞中的自噬性细胞死亡的机制。我们研究结果显示该菌能上调人树突状细胞自噬、ERK1/2、JNK1/2和p38的表达和细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β和IL-10的产生；JNK1/2和p38的抑制上调了自噬的表达和减少了菌的存活，而ERK1/2的抑制下调了自噬的表达和增加了菌的存活；自噬、ERK1/2、JNK1/2和p38的抑制减少了TNF-α、IFN-γ和IL-10的产生，而IL-1β的分泌减少依赖于自噬、ERK1/2和JNK1/2的抑制。该研究阐明了树突状细胞抵御马尔尼菲青霉的机制，获得自噬在树突状细胞抵御马尔尼菲青霉感染的可靠依据，揭示树突状细胞在抗马尔尼菲青霉感染免疫中的作用，为寻找以自噬为切入点进行马尔尼菲青霉感染早治疗、研发疫苗和开发新的抗真菌药物作用靶点提供科学依据。