猪瘟病毒囊膜糖蛋白靶细胞结合位点的鉴定

猪瘟病毒为具有囊膜的RNA病毒，囊膜病毒的感染是通过病毒颗粒靶细胞结合位点介导进入靶细胞的，病毒的细胞结合位点与靶细胞受体是感染的先决条件和物质基础，该位点存在于囊膜糖蛋白中。在CSFV感染机制中，虽然对囊膜糖蛋白所发挥的介导作用有一定的了解，但对CSFV感染过程中，与靶细胞受体特异性结合的位点数目、位点信息、位点是存在那种囊膜糖蛋白上，目前仍是一无所知。本研究利用已有的囊膜蛋白的系列单抗纯化囊膜糖蛋白；靶细胞结合实验筛选囊膜糖蛋白；生物信息学分析、设计、合成Overlapping系列引物，RT-PCR构建噬菌体展示载体，筛选位点所在片段；设计合成该片段的Overlapping多肽，确定靶细胞结合位点的活性肽；分别用氨基酸替代及删除法合成多肽，鉴定靶细胞结合位点的关键氨基酸获得准确信息。研究结果将为CSFV新型阻断型疫苗、药物的设计及感染机制的研究提供重大的理论指导，具有重大的意义