VGLL4调控NEDD9抑制三阴型乳腺癌增殖和转移的机制研究

Triple-negative breast cancer (TNBC) is characterized by extremely aggressive phenotype with rapid distant metastasis and high incidence of relapse and remains a significant clinical challenge. Studies have shown that the Hippo pathway is closely related to tumorigenesis and progression of malignant tumors. Our previous study found that the VGLL4 expression was significantly lowered in TNBC and has significant clinical relevance. Our studies in vivo and in vitro further showed that overexpression of VGLL4 not only significantly inhibited proliferation of tumor cells, but possibly induced another vital gene, NEDD9, which promotes TNBC proliferation and metastasis. Therefore, we will demonstrate the molecular mechanism by TNBC cell lines and breast cancer metastasis mouse model. Further explore the regulation relationship between NEDD9 and important factors, VGLL4 and YAP, in Hippo pathway. Whether through competitive combining Teads or have a new function domain play a role. We will also explore other novel prognostic and predictive indicators in TNBC and provide a new insight to precision cancer treatment.

三阴型乳腺癌(TNBC)恶性程度极高，早期远处转移和高复发率令人堪忧。研究表明Hippo通路与肿瘤的发生发展密切相关，申请人前期对Hippo通路新成员VGLL4的研究显示，VGLL4表达水平在人乳腺癌组织中显著低于癌旁，尤其在TNBC中，并且具有显著的临床相关性。进一步体内、外实验和基因芯片研究发现，过表达VGLL4不仅能显著抑制肿瘤细胞增殖，而且使另一促进增殖和转移的重要基因NEDD9显著下调。因此，本研究拟选取TNBC细胞株及乳腺癌转移小鼠模型进行相关分子机制研究，进一步探究NEDD9与Hippo通路的重要因子VGLL4和YAP三者的调控关系，是否通过竞争性结合Teads而实现，或者有新的功能结构域发挥作用，力图明确相关分子机制，为寻找TNBC相关的预后指标及精准治疗提供新思路。

三阴型乳腺癌恶性程度极高，早期远处转移和高复发率令人堪忧。研究表明Hippo通路与肿瘤的发生发展密切相关，Hippo通路新成员VGLL4在乳腺癌中的作用尚不明确，其下游基因NEDD9在促进乳腺肿瘤进展、转移方面担当着重要的角色。本课题通过探讨VGLL4与NEDD9之间的调控关系，阐明它们在三阴性乳腺癌中的功能和作用，以期寻找到新的分子靶点和治疗策略。 . 对人乳腺癌组织芯片进行免疫组织化学研究（芯片包括534例人乳腺癌组织和121例人乳腺癌旁组织），结果显示乳腺癌组织中VGLL4蛋白质表达水平明显低于癌旁组织(P< 0.01)，临床相关性分析发现VGLL4表达水平与肿瘤的大小、雌激素受体表达水平以及孕激素受体表达水平显著相关。并且VGLL4的表达水平在TNBC组中显著降低，提示VGLL4表达水平高是预后良好的标志。选取MDA-MB-231和MDA-MB-453人乳腺癌细胞系进行功能实验，在细胞生长曲线MTT实验和软琼脂集落形成实验中，过表达VGLL4的实验组细胞增长及集落形成受到明显抑制。裸鼠成瘤实验结果显示过表达VGLL4能显著抑制肿瘤细胞在体内的增殖（P<0.05），并且过表达VGLL4能显著抑制细胞周期。为了提供更可靠的科学依据，对过表达VGLL4的细胞株进行基因芯片分析，结果显示过表达VGLL4后多个基因表达水平发生显著变化，其中Cas的家庭成员NEDD9是显著变化的基因之一。在人乳腺癌样本芯片中对NEDD9进行分析，结果发现乳腺癌组织中NEDD9的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)，进一步分析临床相关性，数据表明 NEDD9的表达水平与肿瘤的大小、淋巴结转移数量、PR表达水平、HER2表达水平密切相关。过表达VGLL4不仅能显著抑制肿瘤细胞增殖，而且使另一促进增殖和转移的重要基因NEDD9显著下调。. 暂无文章报道NEDD9与VGLL4的调控关系。VGLL4对YAP的抑制作用是通过其TDU结构域与YAP竞争TEAD而实现的，本课题相关实验数据表明，VGLL4可以抑制因过表达YAP引起的NEDD9的上调，过表达VGLL4不仅能显著抑制肿瘤细胞增殖来发挥抑癌基因的作用，而且可以通过负调控NEDD9的表达抑制TNBC细胞的生长。这些工作为乳腺癌的临床治疗提供了潜在的分子靶点和新思路