广东紫珠促凝血活性成分及其作用机制研究

Haemorrhage is a common clinical multiple symptoms, severe cases can be life-threatening. Hemostatic drugs had widespread adverse reactions. Therefore it is of great significance to research natural hemostatic drugs. In our prophase research, we found 70% ethanol extraction of Callicarpa kwangtungensis Chun could promote ADP induced platelet aggregation. According to the screening results of its activity tracking, 28 compounds were isolated from 2 compositions of the extraction, among which 8 were new. 4 compounds (2 phenylethanoid glycosides and 2 catalpols ) showed strong promoting activity on ADP-induced platelet aggregation. Pharmacological tests have shown there are other active components, in which there are phenylethanoid glycosides or catalpols. In order to clarify the procoagulant substances in Callicarpa kwangtungensis Chun, reveal the active ingredients and their mechanism. So, Callicarpa kwangtungensis Chun will be systematic study in this subject, to get active ingredients, to investigate their structure-activity relationships. Further to study on the mechanism of strong components. Finally, we can provide scientific basis for finding procoagulant lead compounds and for development of novel procoagulant TCM possessing independent.

出血是临床上常见的多发病症，严重者可危及生命。西药止血存在较为严重的不良反应，因此天然止血药物的研发具有重要意义。在前期研究中，采用活性追踪方法，从具有显著促ADP诱导血小板聚集活性的广东紫珠70%乙醇提取物其中2个活性组分中得到了28个化合物，其中新化合物8个。对28个化合物进行了促ADP诱导血小板聚集活性筛选，4个化合物(2个苯乙醇苷类和2个梓醇类)显示较强的促ADP诱导血小板聚集活性。已有的药理试验表明还存在其它高活性组分，活性组分中还存在苯乙醇苷类和梓醇类，为明确广东紫珠促凝血活性的物质基础、活性成分和作用机制。为此，本课题拟在药物化学和药理学的密切配合下，对广东紫珠展开系统深入研究，得到活性成分，探讨其构效关系，并对活性强的成分进行作用机制研究。为寻找促凝血先导化合物以及研究和开发具有自主知识产权的创新促凝血中药提供科学依据。

出血是临床上常见的多发病症，严重者可危及生命。西药止血存在较为严重的不良反应，因此天然止血药物的研发具有重要意义。广东紫珠为马鞭草科紫珠属植物，民间习称―紫珠草，具有收敛止血，散瘀，清热解毒之功效。用于衄血，咯血，吐血，便血，崩漏，外伤出血等，为民间临床妇科及各科出血症的常用药物，同时广东紫珠也是治疗宫颈出血等常见多发出血病症药物抗宫炎片、抗宫炎胶囊等中成药的主要原料。然而广东紫珠药效物质基础和止血作用机制的尚不明确，严重制约了广东紫珠及相关制剂市场的进一步发展及创新药物的研发。 . 对广东紫珠粗提物进行了促凝血活性筛选，首次发现广东紫珠70%乙醇提取物和粗分后乙酸乙酯部位均具有缩短BT、CT和TT，粗分后正丁醇部位和乙酸乙酯部位、正丁醇部位大孔树脂纯化部位（30%乙醇和50%乙醇）能明显的缩短小鼠的出血和凝血时间，显示出较强的促凝作用，且首次发现乙酸乙酯部分粗分组分显示促ADP诱导血小板聚集活性。. 对广东紫珠提取物化学成分进行了系统研究，分离鉴定了97个化合物，其中新化合物12个，32个化合物为首次从紫珠属植物中分离得到，15个为首次从广东紫珠中获得。. 对广东紫珠单体化合物进行了促凝血活性筛选及作用机理研究，首次从广东紫珠中发现6个促ADP诱导血小板聚集活性的化合物，进一步采用活性追踪法，首次发现广东紫珠中主要成分连翘酯苷B、金石蚕苷单体给药对小鼠出血时间和凝血时间作用不明显，但连翘酯苷B和金石蚕苷不同比例配伍给药后，能明显缩短小鼠出血时间和凝血时间， 促凝血作用显著，并首次阐明了连翘酯苷B和金石蚕苷配伍（1:1）配伍的促凝血作用机理是通过增加血小板数量以及血小板中P-选择素的表达，减少出血时间，且通过内源性和外源性凝血途径共同作用的结果，阐明了广东紫珠促凝血成分及作用机制。. 首次阐明了江西产广东紫珠促凝血成分连翘酯苷B和金石蚕苷的含量不同采收时期动态变化规律，为连翘酯苷B和金石蚕苷促凝血新药开发提供了科学依据和资源参考。. 首次建立了广东紫珠中阿亚黄素的HPLC含量测定方法，为广东紫珠质量控制及评价提供了科学依据。