板蓝根抗病毒多靶点药效物质基础研究

板蓝根为传统中药，有清热解毒、凉血利咽的功能，临床上对多种病毒具有确切的抑制和预防作用。但迄今为止，抗病毒物质基础仍不明确，给药材及制剂的生产和质量控制带来很大困难。综合现有研究结果，板蓝根抗病毒作用可能与核苷类似物、氨基酸结合蛋白干扰DNA合成以及蛋白表达；苯丙素、含硫生物碱的抗氧化作用；有机酸类清除内毒素的作用；多糖成分的免疫促进作用密切相关。因而提出板蓝根抗病毒是多种化学成分多靶点协同效应的假说。本课题设计采用快速溶剂提取、平行分离制备、在线快速检测分析、极微量成分毛细管核磁共振技术、多靶点的高通量活性筛选等现代化研究手段，实现化学成分"化学分离-分析-结构测定-活性筛选-作用机制"研究的快速同步进行。该课题的顺利实施，将有可能对于板蓝根复杂药效物质基础和作用机制的阐明取得突破性进展；多种化学成分极微量结构测定的同时进行多靶点高通量快速筛选，有望建立复杂中药组分的快速在线筛选研究模式

该课题采用加速溶剂提取法、离子交换色谱法、大孔吸附树脂法、高效制备渗透凝胶色谱法等方法，提取分离得到了生物碱、苯丙素、有机酸及多糖等化学部位。通过体外直接抗病毒作用、抗氧化作用、免疫促进作用等多指标高通量筛选，结果表明总有机酸、总苯丙素通过直接抗病毒、抗氧化作用实现抗病毒药效；板蓝根多糖具有较强的免疫促进作用。从而验证课题所提出的板蓝根抗病毒药效为多种成分多靶点的协同作用假说。课题进一步研究了各活性部位中的化学成分单体，得到并确认的化学结构单体成分包括：酚酸类6个、苯丙素类5个和5个均一分子量多糖成分，同系列的化学成分单体的得到，进一步明确了抗病毒相关的物质基础。板蓝根活性部位抗病毒作用机制与靶点研究结果表明，板蓝根通过抑制病毒早期复制相关酶、调节免疫相关细胞因子、抑制细胞感染后期的凋亡过程等来实现其抗病毒作用。课题采用了“化学分离-分析-结构测定-活性筛选-作用机制”的研究路线，基本阐明了板蓝根复杂药效物质基础，初步明确了其作用机制；综合考虑多种化学部位和成分，进行系统多指标的活性筛选，进而明确其物质基础的研究思路和方法，对于今后复杂中药组分的物质基础研究具有一定的借鉴意义。