HSP27在急性尿潴留致膀胱逼尿肌收缩功能障碍中的作用及机制研究

急性尿潴留（AUR）导致的膀胱收缩无力（DU）临床疗效不佳，AUR发生后如何保护膀胱功能、促进其恢复尚缺乏有效手段。逼尿肌细胞肌动蛋白结构损害是导致DU的重要结构基础，目前发现HSP27在许多平滑肌组织中可通过磷酸化作用参与细胞骨架蛋白的聚合，调节平滑肌收缩，但是其具体作用机制尚不明确。在前期实验中我们发现，大鼠AUR致DU模型中HSP27的表达下降。我们推测HSP27的下调和去磷酸化可能是AUR致DU的重要机制。本课题拟通过调节HSP27磷酸化水平后检测离体肌条收缩特性的变化；基因转染或RNA干扰的方法影响体外原代培养逼尿肌细胞HSP27的表达或改变其磷酸化水平。在施加过度机械牵张刺激后不同时相点检测其对逼尿肌细胞肌动蛋白聚合、与收缩相关蛋白的相互作用以及对MLCK的影响。旨在揭示HSP27在AUR致DU中发挥重要作用并探讨其机制，为临床治疗提供思路。

急性尿潴留（AUR）导致的膀胱收缩无力（DU）临床疗效不佳，AUR发生后如何保护膀胱功能、促进其恢复尚缺乏有效手段。逼尿肌细胞肌动蛋白结构损害是导致DU的重要结构基础，本课题以HSP27为切入点，通过调节HSP27磷酸化水平后检测离体肌条收缩特性的变化；基因转染或RNA干扰的方法影响体外原代培养逼尿肌细胞HSP27的表达或改变其磷酸化水平。在施加过度机械牵张刺激后检测其对逼尿肌细胞肌动蛋白聚合、三维培养平滑肌细胞构建人工肌条并检测其收缩力、HSP27与相关收缩相关蛋白的相互作用。我们的研究结果显示：1.AUR后大鼠膀胱的组织结构出现损害，膀胱逼尿肌细胞的超微结构也有一定程度的损害，并都具有一定的时相性特异性，其特点是：在AUR解除梗阻后6h内，膀胱组织结构、逼尿肌超微结构受损逐渐加重，而后逐渐恢复；2.AUR后大鼠膀胱逼尿肌中HSP27的表达变化具有时相特异性，即急性梗阻解除后0hHSP27的表达增高，而后6h内逐渐降低，6h后HSP27的表达逐渐恢复。HSP27的三种磷酸化形式均参与了AUR后HSP27表达时相特异性的变化；AUR后大鼠膀胱逼尿肌HSP27的表达变化趋势与AUR后大鼠膀胱收缩功能的变化趋势一致，并具有相关性。AUR后膀胱HSP27的高表达对膀胱逼尿肌细胞有保护作用；3.成功构建了能高表达及干扰HSP27膀胱平滑肌细胞模型并在体外三维结构培养制作人工肌条，发现HSP27高表达人工肌条在激动剂刺激下收缩力增加，低表达HSP27的人工肌条收缩力下降，平滑肌肌动蛋白F/G比和MLCK表达亦和HSP27表达水平密切相关。因此HSP27作为一种重要的平滑肌收缩相关蛋白，其表达和磷酸化水平参与了AUR后膀胱平滑肌收缩力的调节，并可对膀胱平滑肌的收缩功能损害有一定保护作用。