甘蓝型油菜小孢子胚胎发生基因型依赖性的细胞学及分子机制研究

油菜小孢子培养具有较强的基因型依赖性，但对其作用机理并不清楚，局限了小孢子培养在油菜育种中的广泛应用。本项目以甘蓝型油菜小孢子胚胎发生差异明显的两个基因型(ZS758和ZU61)亲本、F1代及DH群体为材料，通过共聚焦激光扫描显微镜和透射电镜观察小孢子胚胎发生的实时动态变化，从细胞水平研究小孢子胚胎发生的基因型差异；并利用IEF/SDS-PAGE双向电泳、质谱肽质量指纹谱分析和生物信息学等技术，比较热击处理后上述材料蛋白质组表达的差异，分离鉴定热击响应蛋白；并依据目标特异蛋白N端部分氨基酸序列设计简并引物，通过RACE扩增，获得包含完整编码区的全长cDNA；同时结合SSR分子标记，分离克隆控制小孢子胚胎发生的相关基因。通过以上研究，在细胞及分子水平探明小孢子胚胎发生的基因型差异，明确基因型依赖性的分子机制，可望获得具自主知识产权的突破性研究成果，促进油菜育种与产业提升及农业可持续发展。

油菜小孢子培养具有较强的基因型依赖性，但对其作用机理并不清楚，局限了小孢子培养在油菜遗传育种及相关研究中的广泛应用。本项目以甘蓝型油菜小孢子胚胎发生差异明显的两个基因型(ZS758和ZU61)亲本、F1代及DH群体为材料，通过扫描显微镜和透射电镜等观察油菜小孢子胚胎发生的实时动态变化，从细胞水平研究小孢子胚胎发生的基因型差异；并利用IEF/SDS-PAGE双向电泳和生物信息学等技术，比较热击处理后上述材料蛋白质组表达的差异，分离鉴定热击响应蛋白；并依据目标特异蛋白N端部分氨基酸序列设计简并引物，通过RACE扩增，获得包含完整编码区的全长cDNA；同时结合SSR分子标记，分离克隆控制小孢子胚胎发生的相关基因。通过以上研究，在细胞及分子水平初步探明小孢子胚胎发生的基因型差异，明确基因型依赖性的分子机制，促进油菜遗传育种与产业提升及农业可持续发展。