EETs通过拮抗破骨活性抑制肿瘤骨转移？

Epoxyeicosatrienoic acids (EETs) are products of arachidonic acid metabolism catalyzed by cytochrome P450 (CYP) epoxygenases. These small molecules are autocrine and paracrine lipid mediators with important roles in inflammation, cardiovascular function and angiogenesis. EETs possess potent anti-inflammatory properties in the vasculature. In the cardiovascular system, EETs relax artery smooth muscle cells, provide myocardial protection, leading to a reduction in artery blood pressure. EETs promote angiogenesis. EETs stimulate epithelial cell growth. Moreover, EETs are able to accelerate regeneration of multiple organs and tissues, including the liver, kidney, and lung, and can promote wound healing, corneal neovascularization and retinal vascularization in vivo. Furthermore, recent evidence has highlighted EETs as potent promoters of malignant metastasis to the lung, liver and lymph nodes. Previously, using both in vitro and in vivo studies, we observed that EETs significantly attenuated bone loss by inhibition of osteoclast formation and activity and promotion of osteoblastogenesis. Bone resorption by osteoclasts is a critical factor in cancer metastasis to bone. Inhibition of bone resorption with bisphosphonates and other strategies reduces osteolytic bone resorption and improves disease-free survival. Therefore, we believe that EETs might have a negative impact on cancer metastasis to the bone. In this study, we propose to elucidate the role played by EETs in bone metastasis using cell lines, mouse model of bone metastasis and clinical specimens. Our study will not only provide insight into bone metastasis, it will also shed new light on therapeutic targeting of bone metastasis.

生物体内花生四烯酸经过不同代谢途径生成前列腺素和表氧化二十碳三烯酸（EETs）等。近年来，EETs在体内的重要作用逐渐被阐明：EETs降低血压、保护缺氧心肌，促进组织器官再生，抑制炎症的发展；EETs促进肿瘤生长，转移（向肝、肺、淋巴结等）。由于EETs代谢通路靶向治疗潜力巨大，多项临床试验正在进行中。而EETs对肿瘤骨转移的影响还不得而知。申请人前期发现EETs抑制破骨细胞发生及功能，促进成骨细胞分化，对骨质疏松有明显的治疗作用。而破骨活性在肿瘤骨转移中起着重要的作用。申请人认为，EETs可能通过拮抗破骨活性而抑制肿瘤在骨组织中的定植、侵袭，而EETs代谢通路的活性不同可能影响肿瘤骨转移的倾向。本课题拟采用多种骨转移和骨破坏的小鼠和细胞模型，重点探讨EETs代谢通路在骨转移中的作用及分子机制；并结合临床病例，探讨EETs代谢对骨转移发生的潜在预测作用；以期为防治骨转移提供理论依据。

生物体内花生四烯酸代谢主要有三条路径：经过前列腺素合成酶生成前列腺素和血栓素等物质，经过脂氧酶生成白三烯和脂氧素等，经过细胞色素P450（主要是CYP2J2等）代谢生成表氧化二十碳三烯酸（EETs）等。EETs被表氧化物水解酶（sEH，EPHX2编码）降解为活性低的代谢物。近年来，EETs在体内的重要作用逐渐被阐明：EETs降低血压、保护缺氧心肌，促进组织器官再生，抑制炎症的发展；EETs促进肿瘤生长，转移（向肝、肺、淋巴结等）。而EETs对肿瘤骨转移的影响还不得而知。申请人前期发现EETs抑制破骨细胞发生及功能，促进成骨细胞分化，对骨质疏松有明显的治疗作用。而破骨活性在肿瘤骨转移中起着重要的作用。申请人认为，EETs可能通过拮抗破骨活性而抑制肿瘤在骨组织中的定植、侵袭，而EETs代谢通路的活性不同可能影响肿瘤骨转移的倾向。本课题成功利用心脏注射、尾静脉注射、胫骨内注射肿瘤细胞等方法构建肿瘤转移模型，证实了EETs可以抑制多种类型肿瘤细胞（包括乳腺癌、肝癌、肺癌等）的骨转移；同时，我们筛选出了骨转移能力更强的乳腺癌细胞系MBS4-TJGK，为后期研究肿瘤骨转移的调控机制打下了良好的基础。我们证实了EETs通过拮抗破骨活性抑制肿瘤骨转移。但不排除有以下可能机制：1.通过抑制破骨细胞，抑制骨转移病灶血管生成，2.通过抑制NFΚB等通路，抑制骨转移。我们正在验证这些假说。.另外，对肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库的分析发现，在EETs代谢通路中起关键作用的分子中，CYP2J2的表达与肾癌的预后呈负相关，EPHX2的表达与肾癌、宫颈癌的预后呈正相关，EPHX1的表达与前列腺癌、肺癌的预后呈正相关，其机制跟EETs代谢有无直接关系？我们正在做进一步的探索。我们在A549、MBS4-TJGK和MCF7等肿瘤细胞系中分别过表达CYP2J2和EPHX2，发现过表达这些基因对体外的肿瘤细胞生长无明显影响。我们正在验证这些过表达细胞系的向肺、骨转移的能力。.