蛋白质自剪接反应机理的研究

蛋白质自剪接是蛋白质生物合成中后转译水平上发生的一种加工过程。这一发现增添了“中心法则”的新内容，拓宽了遗传信息流的认识。本研究利用模型化合物，含内蛋白子的融合蛋白（MYB）为材料，对其剪切条件、剪接速度、还原剂影响以及脲存在下，内蛋白子的构象变化与剪切功能的关系进行了研究。同时对典型体外系统MIP的几个突变体（MI84、MI94、MI95）的某些性质进行了探讨。在此基础上按内蛋白子的剪切性质对重组蛋白hNGF和HNT-3的快速纯化作了较深入的研究。先后构建了pTXB-NT3 pIMC-NGF 等七种重组质粒，并在E.coli中进行融合表达，产物都为包涵体。经变性与复性处理获得hNT-3纯品，为进一步研究重组蛋白，特别是原核生物的重组蛋白纯化开辟了一条新的途径。