大黄素通过炎症信号通路抑制癫痫发作的实验研究

既往研究发现炎症因子通过刺激脑胶质细胞活化等通路可以形成癫痫病灶；中止炎症信号通路可能抑制癫痫发生；最新发现大黄素对非神经元炎症信号通路具有抑制作用；本课题组在日本也发现大黄素阻断了兴奋性突触传递的释放，并抑制中枢神经系统初级炎症通路的作用，进一步研究发现大黄亦有抑制癫痫异常脑电。提示大黄素有可能通过抑制炎症信号通路达到抑制癫痫的发作。因此本课题拟采用电点燃合并CGP35348诱导建立大鼠癫痫模型；通过实时定量炎症反应基因芯片对癫痫模型神经元炎症症信号通路包括肿瘤坏死因子、血管内皮生长因子及AKT等进行定量测定；再观察不同剂量大黄素对癫痫大鼠模型脑内神经细胞上述炎症信号的抑制作用；进一步研究大黄素对大鼠癫痫模型脑片中神经元异常兴奋性电位的抑制作用及对脑电及癫痫症状的抑制作用。从而证实大黄素通过抑制炎症炎症症信号通路达到抑制癫痫的发作，为传统中药大黄"镇惊熄风"治疗效应提供理论依据。

炎症因子通过刺激脑胶质细胞活化等通路可以形成癫痫病灶；中止炎症信号通路可能抑制癫痫发生。本课题首先构建癫痫动物模型并进行行为学及脑电检测，应用实时定量炎症反应基因芯片对癫痫模型神经元炎症症信号通路进行定量测定，检测不同剂量大黄素对癫痫大鼠模型脑内神经细胞上述炎症信号的抑制作用；特别的，我们对癫痫发作后血脑屏障处P蛋白的表达以及大黄素对其表达的影响进行了深入的研究；同时我们还对替代研究药物鸡矢藤甙酸的抗癫痫作用进行了初步研究，进一步应用RNAi干扰技术研究了脂类代谢异常影响α-突触核蛋白的表达和结构改变的机制。结果发现：1）随癫痫时间延长，P蛋白在血脑屏障处的毛细血管中的含量分布逐渐增多，大黄素干预癫痫模型后，P蛋白在脑组织及脑血管组织中表达均下降；2）P蛋白的表达受NMDA受体活化与脑内炎症因子COX-2的表达调控，大黄素处理后脑组织和血管组织中的COX-2基因表达均被抑制，血管组织中的NMDA受体活性下降，大黄素抑制P糖蛋白过表达的作用机制可能是通过其抗炎症反应作用实现；3）鸡矢藤甙酸可能是有开发潜力的新型抗癫痫药物，其机制可能是通过影响脑内兴奋型及抑制型氨基酸的含量发挥抗癫痫作用；4）脂类代谢异常可能通影响α-突触核蛋白的表达和结构改变，可能是帕金森病的病因之一。这些研究结果证实大黄素通过抑制炎症炎症症信号通路达到抑制癫痫的发作，为传统中药大黄“镇惊熄风”治疗效应提供理论依据，同时我们还发现了新的潜在抗癫痫药物鸡矢藤甙酸以及发现α-突触核蛋白的表达和结构改变可能是帕金森病的病因之一。