银屑病中IL-35蛋白通过IL-10/STAT3调控巨噬细胞的机制研究

Psoriasis is an inflammatory autoimmune skin disease, because its pathogenesis is not very clear, leading to the treatment effect could not achieve ideal results. Interleukin -35 (IL-35) is an immunosuppressive cytokine, which is secreted by natural immune regulation of T cells. In recent years, it has been found that IL-35 plays an important immunosuppressive role in some autoimmune disease, such as the collagen Ⅱ induced arthritis. We found that low expression of IL-35 protein in patients with psoriasis. This suggests that IL-35 gene may be inhibited in the pathogenesis of psoriasis. At the same time, we found that exogenous IL-35 can promote the secretion of IL-10 and inhibit the recruitment of macrophages to achieve better therapeutic effect on psoriasis. These results suggest that exogenous IL-35 may regulate macrophage recruitment by regulating IL-10/STAT3 signaling pathway. In this study, we will further clarify the role of IL-35 in suppression of macrophage recruitment through IL-10/STAT3 signaling pathway used by antibody chip technology, gene knockout mice, knockout of macrophages in vivo and specific knockout of STAT3 on macrophages in mice, signal pathway research, clinical experimental samples. This project will provide new ideas and strategies for the pathogenesis and treatment of psoriasis.

银屑病是一种炎症性自身免疫性皮肤疾病，因发病机制尚不很清楚，故其治疗效果并不理想。白介素-35（IL-35）是自然调节T细胞分泌的一种免疫抑制性细胞因子。近年来发现，IL-35在胶原Ⅱ诱导的关节炎等多种自身免疫性疾病小鼠模型中均有免疫抑制功能。我们前期发现，银屑病患者血浆中低表达IL-35蛋白，这揭示IL-35基因可能在银屑病发病过程中受到抑制。同时我们发现外源性IL-35能通过促进IL-10分泌和抑制巨噬细胞募集对银屑病小鼠具有较好的治疗效果。综上结果提示，外源性IL-35可能通过调节IL-10/STAT3信号通路抑制巨噬细胞的募集。本研究将通过抗体芯片技术、体内敲除巨噬细胞、特异性敲除巨噬细胞上的STAT3小鼠模型、信号通路研究、临床样品研究等实验，进一步明确IL-35通过IL-10/STAT3信号通路对巨噬细胞募集的整体调控作用，将为揭示银屑病的发病机制及治疗提供新思路和新策略。

前期研究表明，IL-35在一些免疫相关疾病中发挥关键作用。然而，关于IL-35在银屑病发病机制中的作用研究较少。有几项研究主要检测了IL-35在银屑病患者体内的表达情况，然而人们的检测结果并不一致。有研究发现IL-35在银屑病患者体内高表达，但是也有研究发现IL-35在银屑病患者体内的表达低于健康对照组。我们的研究发现，银屑病患者体内IL-35无论在血清、外周血单个核细胞还是在炎症皮肤组织中都是高表达的。本项目结合动物模型及临床样本展开研究，IL-35蛋白能够显著抑制银屑病模型小鼠体内巨噬细胞的浸润和募集，促进抑炎性细胞因子IL-10的表达。当我们用IL-10拮抗剂处理模型小鼠后，再加入IL-35蛋白治疗，治疗效果虽然不如单纯IL-35蛋白治疗效果好，但小鼠的耳朵组织及脾脏组织中STAT3/pSTAT3的表达没有显著性变化，这一结果与我们实验预期有偏差。然而，在实验过程中，我们的研究意外发现经过IL-35治疗后，IL-35能够显著抑制银屑病小鼠脾脏及皮损组织中MDSCs的浸润与募集，同时能够调控MDSCs两个亚型的比例变化情况。所以，我们深入研究了IL-35是否也可能通过调控MDSCs的募集来发挥免疫抑制功能。.主要研究结果如下：研究发现利用IL-35治疗IMQ诱导的银屑病小鼠模型后，小鼠体内的MDSCs显著减少，其两个亚型：粒细胞样MDSCs（G-MDSCs）和单核样MDSCs（M-MDSCs）的比例也显著降低。体内过继回输银屑病模型小鼠的MDSCs可显著加重IL-35治疗的银屑病小鼠的银屑病样症状。流式检测发现，IL-35治疗后，模型小鼠体内MDSCs分泌的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)显著降低，这一结果说明，iNOS很可能是MDSCs在银屑病发病过程中发挥促炎作用的重要炎性介质。接下来，将IMQ诱导的WT或iNOS-/-小鼠中MDSCs过继转移至不同处理组的银屑病模型中，结果发现，iNOS-/-模型小鼠的MDSCs过继转移对IL-35功能几乎没有影响，这一结果进一步表明，银屑病小鼠模型中MDSCs表达的iNOS确实对疾病的进展起促进作用。本研究阐明了IL-35通过抑制银屑病小鼠体内MDSCs分泌iNOS从而对银屑病的发展起抑制作用。从新的角度揭示银屑病的发病机理，为人们研究银屑病的发病机制及治疗提供新思路和新策略。