水杨酸钠对幼年和成年豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元差异性调控及其机制

采用豚鼠为试验对象分三个阶段进行实验：首先：①.分离出生1天豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元，采用无水杨酸钠和含水杨酸钠细胞培养并设计混合、分开和先分开后混合三种不同方式进行细胞培养；②.通过Brdu抗体测试耳蜗毛细胞和听觉初级神经元在不同的培养方式下的凋亡和增殖情况；③.激光共聚焦显微镜检测不同培养方式胞内游离Ca2+含量。以明确毛细胞与听觉初级神经元是如何共生和相互影响的。其次：①.在体水杨酸钠给药观测幼年和成年豚鼠听觉初级神经元神经递质GABA 、GLu在螺旋神经节的含量、分布；②.生物电镜观测毛细胞、听觉神经纤维及神经末梢突触超微结构的改变；③.测试双侧耳DPOAE、ABR阈值、CAP和CM振幅以及潜伏期的改变。明确水杨酸钠如何差异性调控幼年和成年豚鼠耳蜗毛细胞和听觉初级神经元及其产生的听力学后果；最后：损毁单侧耳蜗后在体水杨酸钠给药观察与第二阶段同样的技术指标，以进一步明确其机制。