利用基因回转化技术改良洁霉素生产菌

本项目将29个林可霉素生物合成基因按照48种方案进行体外重组，获得的重组子回转化林可霉素生产菌，并对近三万个转化子进行初筛和复筛。在1mdH基因的回转化克隆中，获得一个不产黑色素且林可霉素B组份低于1%的转化子，由其生产的低B组份林可霉素可大大提高林可霉素半合成产物（氯洁霉素）的收得率；以三种含有1mdH基因的不同重组子回转化生产菌，分别获得三株高产林可霉素的工程菌，其摇瓶效价比对照生产菌高53.6-110.6%不等，50吨发酵罐效价比对照菌提高20-25%，研究表明1mdH可能是林可霉素生物合成途径中的关键基因；另外，建立了林可链霉菌的转化系统，转化率高达10（5）/μgDNA。该项目研究成果为利用基因工程技术改良抗生素生产菌提供了一种普适战略。