GOLM1/TLR9途径调节自噬促进肝癌恶性潜能的机制研究

Recurrence and metastasis are the main reasons that affect the long-term prognosis of HCC patients, but its molecular mechanism is not well understood. Our previous study found that GOLM1 was an important molecule to promote invasion and metastasis of HCC. Mass spectrometric analysis and IP technique indicated that GOLM1 may interact with TLR9 and could regulate TLR9 at the gene level. Besides, our data suggested that TLR9 was highly expressed in HCC tissues and was closely related to the poor prognosis of HCC patients. It was found in vitro that high level of autophagy was in concordance with high expression of GOLM1 and autophagy was decreased as well as level of TLR9 expression after knockout of GOLM1. According to our previous outcomes, we raise a presumption that "GOLM1 may interact with TLR9 to regulate the expression of autophagy related genes and enhance autophagy activity , thus promote the invasion and metastasis of liver cancer cells. In this project, we will focus on how the GOLM1 / TLR9 regulate the level of autophagy to affect the malignant potential of liver cancer cells by using experimental technique such as Co-IP , high - throughput mass spectrometry and chip technology.

术后复发、转移是影响肝癌患者长期预后不佳的主要原因，然而其具体分子机制尚不十分明确。课题组前期研究发现 GOLM1是调控肝癌侵袭、转移的重要分子，质谱分析及IP技术提示GOLM1与TLR9存在相互作用，且在基因水平可影响TLR9。组织芯片提示TLR9在肝癌组织中高表达，且与肝癌患者预后差密切相关。另外，体外实验发现GOLM1高表达时细胞自噬高水平，敲减GOLM1后TLR9表达量下降，细胞自噬水平降低。据此提出“GOLM1通过与TLR9相互作用，调控自噬相关基因表达，上调自噬活性，从而增加肝癌细胞侵袭转移能力”的假设。进一步，我们将围绕GOLM1/TLR9调控机制展开研究，采用Co-IP、高通量质谱分析及芯片技术等方法明确GOLM1/TLR9功能通路如何调节自噬水平对肝癌细胞恶性潜能的影响。探索针对该通路进行干预是否抑制肝癌的生长和侵袭转移。

肝细胞肝癌（HCC，简称肝癌）是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其恶性程度高，早期症状不明显，多数患者发现时病情已进展至中晚期，错过了早期手术根治的机会。近年来随着肝癌早期筛查及诊疗技术的不断完善，部分患者获得了根治手术的机会。然而，即便是早期发现获得根治性手术切除的患者，术后仍有较高的转移复发率。因此，积极探索肝癌增殖、侵袭和转移的调控机制，寻求有效的预测术后复发的标志物以及开发新的干预措施和综合治疗手段对提高肝癌患者的预后具有重要的临床意义。.免疫逃逸是肿瘤的重要特征之一，也是促进肿瘤恶性进展的重要因素之一。程序性细胞死亡蛋白配体-1（PD-L1）是一个重要的免疫负性调控分子，在诱导肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。当肿瘤细胞表面的PD-L1与其受体程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）结合，能够阻止淋巴细胞的活化，减少细胞因子的产生，引起负性免疫调控反应。阻断PD-L1与PD-1两者之间的结合，可以阻断负性免疫调控信号的传导，使肿瘤微环境中的淋巴细胞活性恢复，增强机体的抗肿瘤免疫反应能力。课题组前期研究发现 高尔基膜蛋白1(GOLM1)是调控肝癌侵袭、转移的重要分子，并且与肿瘤微环境中的免疫抑制有关。但是，GOLM1与免疫抑制分子PD-L1在肝细胞癌中的关系仍不清楚。组织芯片提示GOLM1在肝细胞癌组织中高表达、与患者预后相关,并且GOLM1与PD-L1表达呈正相关。我们从分子水平发现GOLM1通过提高EGFR水平促进STAT3的磷酸化，进而上调PD-L1的转录表达。我们的研究揭示了GOLM1可作为PD-L1的一种新的正向调节因子，其异常表达在癌症免疫逃避和进展中起着至关重要的作用。本研究为我们了解肝细胞癌中PD-L1表达的调控机制提供了新的视角，可能为肝癌免疫治疗提供新的靶点。本项目发表了13篇重要论著，培养了5名博士研究生。