牛黄与蟾酥配伍减毒的物质基础和机理研究

基于中医临床实践和现代研究表明牛黄与蟾酥配伍可减低蟾酥的心脏毒性。本项目利用现代分析手段和生物效应评价方法研究牛黄与蟾酥及其毒效组分配伍减毒的物质基础和减毒机理。工作路径是：① 在蟾酥诱发心律失常的整体模型上系统整合电生理、心脏神经递质及心肌毒理三方面指标，阐释牛黄多途径干预/减毒的效应特点和物质基础。 ② 采用整体动物实验方法研究牛黄与蟾酥配伍后毒效成分的体内代谢和减毒转化，以及牛黄有效组分在细胞、分子、基因水平的减毒机理。从而揭示牛黄与蟾酥配伍减毒的科学内涵，为蟾酥临床用药的安全及新药开发提供科学依据。

基于中医临床实践表明牛黄与蟾酥配伍可减低蟾酥心脏毒性。本项目研究了蟾酥及其毒性成分的心脏毒性，和牛黄配伍减毒的物质基础与作用机理。结果表明：① 蟾酥和蟾蜍甾烯类毒性成分，显著诱导豚鼠心律失常，毒性早期表现为兴奋性室性心律失常；而后期表现为抑制性心动过缓和传导阻滞。左心室心功能监测也表明，蟾酥毒性为心室肌收缩压下降，而舒张压上升的心肌收缩功能异常。离子通道抑制剂干预发现，蟾酥诱导室性心律失常与Na通道和Na离子水平有密切关系。② 牛黄显著抑制蟾酥诱导的心律失常发生，改善心肌离子超载和生化指标异常。进一步筛选发现牛黄胆红素和氨基酸部位具有减毒作用，而胆汁酸部位无效。单体成分胆红素和牛黄酸，均显著改善蟾酥诱导的豚鼠各类型心律失常和心功能异常。③ HPLC-ESI-TOF-MS分析不同给药组蟾蜍甾烯及其代谢产物在豚鼠心脏水平，发现牛磺酸和胆红素均能显著抑制了毒性物质蟾蜍甾烯的心脏摄取。牛磺酸和胆红素能够抑制蟾蜍甾烯诱导的豚鼠心室肌细胞内Na离子上升,从而减轻其心律失常的发生。上述研究发现了蟾酥心脏毒性的毒理学特点，证实了牛黄/蟾酥临床配伍的减毒效应，揭示了牛黄减毒效应的物质基础以及减毒原因。