CryAB融合蛋白表达系统的构建以及对软骨细胞增殖分化影响的研究

前期研究发现CryAB，一种小分子热休克蛋白编码基因，在下颌前导刺激髁突软骨生长改建过程中起着重要作用。目前国内外对该基因在软骨内成骨过程中的调控作用和机理的报导甚少。本研究拟使用分子克隆技术，构建携带CryAB表达序列的原核蛋白表达系统。通过外源蛋白调控大鼠髁突软骨细胞和ATDC5软骨前体细胞分化增殖过程。结合分子生物学和蛋白相关技术，分析软骨细胞不同分化时期特定指标变化。另一方面构建携带CryAB表达序列的哺乳动物蛋白表达系统，结合稳定转染技术，筛选稳定过表达CryAB融合蛋白的软骨细胞系。应用软骨生成信号通路基因芯片技术，检测CryAB在软骨细胞增殖分化过程中，历经软骨前体细胞，软骨细胞，肥大软骨细胞与成熟软骨期，其下游调控的目标基因，综合分析这一新基因在调控髁状突软骨生长过程的具体机理。为更深入理解功能矫治促进下颌生长与髁状突软骨生长改建过程中调控机制提供理论基础。

前期研究发现CryAB，一种小分子热休克蛋白编码基因，可能在下颌前导刺激髁突软骨生长改建过程中起着重要作用。目前国内外对该基因在软骨内成骨过程中的调控作用和机理的报导甚少。本研究拟使用分子克隆技术，构建携带CryAB表达序列的原核蛋白表达系统。通过外源蛋白调控大鼠髁突软骨细胞和ATDC5软骨前体细胞分化增殖过程。结合分子生物学和蛋白相关技术，分析软骨细胞不同分化时期特定指标变化。另一方面构建携带CryAB表达序列的哺乳动物蛋白表达系统，结合稳定转染技术，筛选稳定过表达CryAB融合蛋白的软骨细胞系。应用软骨生成信号通路基因芯片技术，检测CryAB在软骨细胞增殖分化过程中，历经软骨前体细胞，软骨细胞，肥大软骨细胞与成熟软骨期，其下游调控的目标基因，综合分析这一新基因在调控髁状突软骨生长过程的具体机理。研究结果显示CryAB在软骨细胞增殖分化过程中主要在软骨细胞增殖以及细胞外基质合成等方面起重要作用。本研究为更深入理解功能矫治促进下颌生长与髁状突软骨生长改建过程中调控机制提供理论基础。