藏药蓝花荆芥抗单纯疱疹1型病毒功效成分研究

在藏医药理论指导下，通过前期筛选发现蓝花荆芥（Nepeta coerulescens Maxim.）具有抗单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus 1，HSV-1）活性。本课题拟采用溶剂、超声等提取方法和各种色谱分离技术对蓝花荆芥组分进行提取分离；利用已有的抗病毒药物筛选平台开展提取物抗HSV-1活性筛选。同时，采用生物活性追踪的方法，通过色谱和光谱技术，分离、纯化及鉴定活性提取物中的抗病毒成分。利用波谱方法（紫外光谱、红外光谱、质谱和一维、二维核磁共振等）以及色谱-波谱联用技术（如高压液相色谱-质谱联用、高压液相色谱-核磁共振联用等）鉴定分离获得的活性成分的结构和构型。对抗HSV-1活性成分的作用机制进行探讨，为抗HSV创新药物先导物的发现提供物质基础。

本课题前期研究发现蓝花荆芥具有抗单纯疱疹I型病毒（HSV-I）作用。因此，采用溶剂提取方法得粗提物浸膏，将其溶于水，用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得4个不同极性部位。通过体外Vero细胞模型，采用细胞病变效应法（CPE）检测其细胞毒性及抗HSV-I活性，发现乙酸乙酯相、石油醚相两个抗HSV-I活性部位，且乙酸乙酯部位活性更强，据此对该部位进行了追踪分离，得到9种蓝花荆芥提取物，通过活性检测发现其中有4种提取物对HSV-I引起的细胞病变有不同程度的抑制作用。采用各种柱层析方法对活性提取物进行分离，得到5个单体化合物，并对其进行抗HSV活性检测。结果表明，其中单体B在TC0 =25ug/ml时，大于75%的细胞未出现病变，表明该单体具有抑制HSV-I病毒导致细胞病变的作用。通过结构鉴定确定该化合物为没食子酸，为蓝花荆芥抗HSV活性成分，最后对该化合物进行了抗病毒作用机制的探讨。通过本研究，对蓝花荆芥抗HSV-I的物质基础有了进一步认识，为进一步进行结构和药效关系的研究奠定了基础，可为抗 HSV-1 创新药物先导物的发现提供重要依据。