基于MDR1技术研究冰片佐使作用与P-糖蛋白的相关性

项目在前期研究基础上，选择冰片-麝香为研究对象，从胃肠吸收和分布环节，以冰片佐使作用与P-糖蛋白的相关性为中心，基于质谱联用的生物样品分析技术，结合特异性研究P-糖蛋白介导药物相互作用的MDR1相关技术开展研究。.研究麝香配伍冰片前后，在MDR1基因敲除小鼠(P-糖蛋白缺失)/野生小鼠模型中的血药动力学和脑组织分布动力学特征及差异；在MDR1转染MDCK细胞模型(特异性表达P-糖蛋白)/MDCK细胞模型中的转运动力学特征及差异；定量测定分析野生小鼠模型中肠道、脑组织细胞膜上，以及MDR1转染MDCK细胞模型中细胞膜上的P-糖蛋白活性及表达量的差异。综上阐明冰片佐使作用与P-糖蛋白的相关性及作用机制。.研究可从分子水平、细胞水平和整体动物水平阐明冰片佐使作用在吸收和分布层面的生物学基础；有利于将MDR1相关技术系统地引入中药组方理论的研究；为中药药性理论的现代研究提供思路和方法。

课题以冰片佐使作用与P-糖蛋白的相关性为研究中心，采用大鼠在体肠吸收模型开展了冰片对麝香酮吸收转运的影响研究；运用MDR1转染的MDCK-Ⅱ细胞模型开展了冰片对栀子苷跨膜转运的影响研究；开展了冰片对麝香酮小鼠体内动力学特征的影响研究；采用大鼠门静脉吸收动力学模型考察了冰片对小檗碱吸收的影响；此外，采用分子对接技术，以P-糖蛋白晶体结构3G5U为蛋白受体进行了冰片与P-糖蛋白的分子模拟对接实验研究。结果显示，冰片促进麝香酮的吸收和栀子苷的跨膜转运与MDR1表达的P-糖蛋白密切相关，但这一作用对盐酸小檗碱的体内吸收影响较弱，此外冰片与P-糖蛋白分子模拟对接affinity值与P-gp抑制剂维拉帕米相当。课题从吸收和分布角度，在整体动物、细胞、分子水平水平，初步阐明了基于MDR1介导的冰片佐使作用与P-糖蛋白的相关性，为中药药性理论的现代研究提供新的思路和方法。