RhoA/Rho激酶信号通路在犬急性肺血栓栓塞症肺血管收缩中作用及机制研究

Acute pulmonary thromboembolism (APTE) is a serious and life-threatening disease, with a lethal rate of 30% when untreated. Right ventricular failure due to increased pulmonary vascular resistance(PVR)is the prime cause of death in APTE. Vasoactive mediators, including thromboxane A2(TxA2), serotonin(5-HT) and endothelin-1(ET-1)palys an important role in the PVR increase in APTE. Recent studies show that RhoA/Rho-kinase pathway play a key role in the regulation of vascular smooth muscle contraction caused by TxA2, 5-HT and ET-1 in the pathogenesis of various vascular diseases.However,contribution of the RhoA/Rho-kinase pathway in APTE remains unclear. The purpose of this study is to investigate whether the RhoA/Rho-kinase pathway is involved in a key role in vasoconstriction caused by TxA2, 5-HT and ET-1 in the APTE canine model. The safety and efficacy of Rho kinase inhibitor fasudil for the attenuation of vasoconstriction in the APTE canine model will also be evaluated.

肺血管阻力升高引起的右心室功能不全是急性肺栓塞主要致死原因。血栓素A2（TxA2）、5-羟色胺（5-HT）、内皮素-1（ET-1）等血管收缩因子水平升高引起肺血管收缩在该病理过程中起重要作用。已有研究表明在多种血管性疾病中上述血管收缩因子引起的血管收缩均通过RhoA/Rho激酶信号通路介导，但该信号通路在急性肺栓塞中的作用机制仍不明确。我们推论，TxA2、5-HT、ET-1引起的APTE肺血管收缩同样通过RhoA/Rho激酶信号通路介导，而通过抑制该信号通路可以有效缓解APTE肺血管收缩。本实验拟使用改良介入方法建立与人体病理生理过程更相似的犬自体血栓急性肺栓塞模型，通过体内体外实验，研究RhoA/Rho激酶信号通路在TxA2、5-HT、ET-1引起急性肺栓塞肺血管收缩这一病理过程中的作用及机制，并观察Rho激酶抑制剂法舒地尔对改善急性肺栓塞右心室功能不全方面的安全性及有效性。

急性肺栓塞(APE)是严重危害人类健康的疾病，高危患者的死亡率仍高达15%。肺血管阻力(PVR)的急剧升高引起肺动脉高压，从而导致右心室功能不全是APE患者主要致死原因。PVR的升高由肺血管床阻塞以及肺血管收缩所致。既往研究显示，Rho激酶可通过抑制RhoA/Rho激酶信号通路，缓解鼠肺栓塞模型的肺血管收缩，从而减轻肺动脉高压，但尚存在以下问题：①模型建立所应用的聚苯乙烯微球不能准确模拟血栓所致的血液因子活化作用机制；②实验动物老鼠与大体动物的神经体液调节方面差别较大。③鼠肺体积小，针对肺栓塞以及右心室功能的一些评价手段在该模型上无法实施。因此，本研究通过改良的介入方法建立稳定伴有右心室功能不全的犬APE模型，探索RhoA/Rho激酶信号通路及其他机制在有效地缓解APE后PVR升高中的作用。研究结果证实通过优化介入导管的管径，改良自体血栓制备方法，在监测肺动脉及体循环血流动力学基础上，可安全有效地建立伴有右心室功能不全的犬自体血栓急性肺栓塞模型；证实RhoA、Rho激酶在犬自体血栓APE中表达及活性明显增强，而Rho激酶抑制剂法舒地尔能够在一定程度上降低犬自体血栓APE模型的肺动脉压力；并且初步探讨了血管紧张素II在促进慢性血栓性肺动脉高压形成中的作用。