TGFβ受体抑制剂诱导肝包虫外囊壁钙化的实验研究

Hydatid disease caused by Echinococcus granulosus, Cystic echinococcosis (CE), is an endemic problem in many countries of the world, with the liver being the most frequently involved organ.Most parasitic cysts with calcified walls, often associated with degenerative content and decreased size of hydatid cysts, are biologically inactive and clinically silent. When calcification is extensive, death of the parasite is implied because the large calcified surface reduces the nutritional exchange between the cyst and the surrounding parenchyma. Thus, pharmacological modulation of calcification in pericysts may be a new therapeutic target for this disease. .A critical role in the calcification process is performed by transforming growth factor-beta (TGF-βs), which is a particularly well-studied cytokine and widely regarded to have "bone-inducing" properties. In this study, we elucidate the function of TGF-β in the pericysts calcification process using pericyst cell cultures and an animal model of CE.

囊型肝包虫病是一种危害严重的人畜共患寄生虫病，目前药物治疗手段尚存在不足。本研究围绕着外囊壁钙化往往提示着包虫生物学上失去活性，临床上处于静止期这一现象，借鉴TGFβ在骨骼系统中调控钙化成骨作用的理论，阐明肝包虫外囊壁细胞的成骨细胞样表型潜能；探讨TGFβ在肝包虫外囊壁细胞钙化过程中的作用及机制；探索药物调控体内TGFβ信号活性诱导肝包虫外囊壁钙化的安全性与可行性。转变传统杀死细粒棘球蚴本身的药物治疗靶点，探讨以宿主来源的包虫外囊壁为靶点的新的治疗手段。

囊型肝包虫病是一种危害严重的人畜共患寄生虫病，目前药物治疗手段尚存在不足。本研究围绕着外囊壁钙化往往提示着包虫生物学上失去活性，临床上处于静止期这一现象，借鉴TGFβ在骨骼系统中调控钙化成骨作用的理论，阐明肝包虫外囊壁细胞的成骨细胞样表型潜能；探讨TGFβ在肝包虫外囊壁细胞钙化过程中的作用及机制；探索药物调控体内TGFβ信号活性诱导肝包虫外囊壁钙化的安全性与可行性。研究发现：从囊型肝包虫周围纤维囊壁内分离体外培养外囊壁细胞在成骨培养基条件下,该细胞具有成骨细胞样表型潜能。证实TGF-β1经典信号通路“I型受体- Smad”在调控外囊壁细胞成骨起到决定性作用。TGF-β1对RUNX2、Osterix的调控作用是其作用的基础；从我们构建细粒棘球蚴小鼠活体内荧光发光模型，并对小鼠肝脏中的细粒棘球蚴感染灶进行定位及量化分析，并可通过红/绿荧光强度比来检测原头蚴活性，探讨构建小鼠活体内生物发光模型的可能性；原头蚴和囊液在体外都能刺激小鼠脾细胞TGF-β分泌增加，提示原头蚴和囊液中均含有一些能促使宿主产生TGF-β的抗原物质，进而猜测TGF-β分泌增加可能在包虫病的免疫逃避中发挥一定作用。细粒棘球蚴通过促进脾细胞分泌抑制性分子TGF-β1而促使CD4+CD25+T调节细胞分化，从而下调NK细胞活性受体NKG2D的表达，最终导致NK细胞对原头蚴的杀伤减弱，而形成对宿主的免疫逃避。TGF-β1受体阻断剂SB-525334可能在临床上预防包虫病的复发有一定实际意义；同时发现，肝细粒棘球蚴病患者钙化外囊壁上TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、BMPRⅡ、IGF1R和ERα表达量较高，钙化相关因子通过与受体结合，可能在肝细粒棘球蚴外囊钙化过程中发挥着重要作用。项目研究结果转变传统杀死细粒棘球蚴本身的药物治疗靶点，探讨以宿主来源的包虫外囊壁为靶点的新的治疗手段。此外，本研究提出肝包虫周围纤维囊壁细胞具有成骨潜能(属异位钙化)；TGFβ是囊壁钙化的重要调节因子；抑制TGFβ生物学活性可促进囊周钙化，并提出可能的分子机制。为非骨组织的异位钙化的机制提供了一定补充。